產(chǎn)品名稱(chēng) | 小鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Mouse DAT ELISA Kit |
分類(lèi) | Mouse/小鼠Elisa試劑盒 | 檢測(cè)范圍 | 0.625ng/mL-40ng/mL |
靈敏度 | 0.3125ng/mL | 貨號(hào) | PM33119 |
規(guī)格：48T/96T
樣本類(lèi)型：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物學(xué)樣本
有效期：6個(gè)月
供貨狀態(tài)：現(xiàn)貨
檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），通過(guò)特異性抗體結(jié)合小鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)，經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化顯色反應(yīng)，定量檢測(cè)樣本中DAT濃度。
操作步驟
樣本準(zhǔn)備
血清/血漿：3000 rpm離心10分鐘，避免溶血或脂血干擾。
細(xì)胞上清：離心去除顆粒物，分裝保存于-20℃。
試劑準(zhǔn)備
平衡：所有試劑及板條需室溫平衡20分鐘。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)喊凑f(shuō)明書(shū)梯度稀釋至所需濃度。
加樣與溫育
標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入50 μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品。
樣本孔：先加10 μL待測(cè)樣本，再加40 μL稀釋液。
空白孔：僅加稀釋液。
每孔加入100 μL HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體，37℃孵育60分鐘。
洗滌
棄液后拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液靜置1分鐘，重復(fù)洗滌5次。
顯色與終止
每孔加入底物A、B各50 μL，37℃避光反應(yīng)15分鐘。
加入50 μL終止液，顏色由藍(lán)變黃。
檢測(cè)
酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本濃度。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)前
避免反復(fù)凍融樣本或試劑。
不同批次試劑不可混用。
操作中
嚴(yán)格控制溫育時(shí)間和溫度。
洗滌需徹底，避免交叉污染。
數(shù)據(jù)解讀
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)R2應(yīng)≥0.99，否則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍時(shí)，需稀釋后重測(cè)。
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關(guān)鍵字： 小鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白;DAT;ELISA試劑盒;
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