商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Mouse IGFBP-1 ELISA Kit |
檢測(cè)范圍 | 0.3125ng/mL-10ng/mL | 貨號(hào) | PM33279 |
檢測(cè)原理
雙抗體一步夾心法（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，ELISA）。
樣本要求
類型：血清、血漿、組織勻漿、尿液、腦脊液等；
體積：50-100μL。
試劑盒組成
微孔酶標(biāo)板（96孔/48孔）；
標(biāo)準(zhǔn)品（濃度梯度）；
檢測(cè)抗體-HRP、底物（A/B）、終止液；
洗滌緩沖液（需稀釋）、封板膜、說(shuō)明書。
保存與有效期
保存溫度：2-8℃；
有效期：6個(gè)月（未開封）。
操作步驟概要：
準(zhǔn)備：試劑平衡至室溫，稀釋標(biāo)準(zhǔn)品與樣本（如需），配制洗滌液。
加樣：向微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品及已處理的待測(cè)樣本。通常設(shè)置復(fù)孔。
溫育：封板，在37°C孵育。
洗滌：倒掉孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板，甩干。
加檢測(cè)抗體：每孔加入酶標(biāo)檢測(cè)抗體。
二次溫育：封板，再次37°C孵育。
洗滌：同上。
加底物：每孔加入TMB底物液。
避光顯色：室溫避光孵育（時(shí)間按說(shuō)明書，如15-30分鐘）。
加終止液：每孔加入終止液終止反應(yīng)。
讀數(shù)：立即（通常在30分鐘內(nèi)）用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)量各孔OD值。可設(shè)置參考波長(zhǎng)（如630nm）扣除非特異性背景。
結(jié)果計(jì)算：
計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的平均OD值（減去空白孔值，如有）。
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X軸），對(duì)應(yīng)的平均OD值為縱坐標(biāo)（Y軸），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性最好使用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4PL）。
根據(jù)樣本的平均OD值，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其對(duì)應(yīng)的IL-5濃度。
若樣本被稀釋過(guò)，需乘以稀釋倍數(shù)得到最終濃度。
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關(guān)鍵字： 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1;IGFBP-1;ELISA試劑盒;
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