用途

本試劑盒用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿液、細胞上清液及其他生物液體中的C-型鈉尿肽（CNP）含量，適用于科研用途，不用于臨床診斷。

檢測原理

采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。具體步驟如下：

固相抗體包被：微孔板預包被純化的大鼠CNP抗體。

抗原-抗體結合：樣本中的CNP與固相抗體結合后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物。

顯色反應：洗滌后加入底物TMB，在HRP催化下產生藍色產物，酸性終止液作用后轉為黃色。

定量分析：在450 nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣本中CNP濃度。

試劑盒組成

96孔配置：

預包被微孔板（96T）

CNP標準品（濃度梯度）

HRP標記檢測抗體

濃縮洗滌液（30 mL，20×）

TMB顯色底物

終止液

封板膜、說明書

48孔配置：

半塊微孔板（48T）

其他組分按比例減少

樣本要求

血清/血漿：采集后離心去除顆粒物，避免溶血或反復凍融。

細胞上清液：離心去除沉淀后分裝保存于-80℃。

組織樣本：勻漿后離心取上清液檢測。

操作步驟

標準品稀釋：按說明書梯度稀釋。

加樣與孵育：每孔加入標準品或樣本，37℃孵育1小時。

洗滌：洗板5次，去除未結合物。

酶標抗體孵育：加入HRP標記抗體，37℃孵育30分鐘。

顯色與終止：加入TMB避光顯色15分鐘，終止后30分鐘內檢測。

注意事項

試劑盒保存于2-8℃，復溶后標準品需分裝凍存。

避免交叉污染，不同批次組分不可混用。

顯色時間需嚴格控制，終止后顏色穩(wěn)定性有限。

計算與結果

以標準品OD值繪制標準曲線（四參數擬合），樣本濃度需落在曲線線性范圍內。

性能參數

靈敏度：通常≤1.0 pg/mL

檢測范圍：5–1000 pg/mL（具體以實際標準曲線為準）

精密度：板內變異系數<10%，板間<15%

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