商品屬性

用途：本試劑盒用于定量檢測大鼠血清、血漿及相關液體樣本中RANK的濃度，適用于科學研究用途。

實驗原理

采用雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）。將純化的大鼠RANK特異性抗體預包被于微孔板，形成固相抗體。加入待測樣本后，樣本中的RANK與固相抗體結合；隨后加入酶標記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物。經(jīng)洗滌去除未結合物質后，加入底物TMB顯色。TMB在辣根過氧化物酶（HRP）催化下產生藍色產物，終止反應后轉為黃色。顏色的深淺與樣本中RANK濃度呈正相關，通過450 nm波長測定吸光度（OD值），結合標準曲線計算目標蛋白含量。

試劑盒組成

預包被微孔板：96孔（12條×8孔），含抗大鼠RANK抗體。

標準品：系列濃度RANK凍干粉或溶液（需復溶）。

酶標抗體：HRP標記的抗大鼠RANK抗體。

顯色底物（TMB）：避光保存。

終止液：酸性溶液（如2M H?SO?）。

洗滌緩沖液：20×濃縮液，需稀釋使用。

樣本稀釋液：用于樣本預處理。

封板膜：實驗過程中覆蓋微孔板。

操作步驟

標準品與樣本準備：復溶標準品并梯度稀釋；樣本按需稀釋。

加樣：每孔加入標準品或樣本，37℃孵育。

洗滌：棄液體，洗滌緩沖液洗板3-5次。

加酶標抗體：孵育后洗滌。

顯色：加入TMB，避光反應，終止后測定OD值。

注意事項

試劑盒需在有效期內使用，避免反復凍融。

樣本避免溶血或脂血，建議分裝保存于-80℃。

操作時需佩戴防護用具，終止液具腐蝕性。

結果計算需以復孔平均值和標準曲線為準。

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