產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），用于定量檢測(cè)人血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或尿液等樣本中的上皮性鈣黏附蛋白（CDHE/E-cadherin）含量。具有高靈敏度、高特異性和穩(wěn)定的重復(fù)性，適用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人上皮性鈣黏附蛋白ELISA試劑盒 | 英文名稱(chēng) | HumanCDHE/E-cadherin |
分類(lèi) | Human/人Elisa試劑盒 | 檢測(cè)范圍 | 62.5pg/mL-4,000pg/mL |
靈敏度 | 31.25pg/mL | 貨號(hào) | PH33227 |
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板：96孔或48孔（根據(jù)規(guī)格選擇），包被抗CDHE抗體。
標(biāo)準(zhǔn)品：濃度梯度凍干粉或溶液，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。
檢測(cè)抗體：HRP標(biāo)記的抗CDHE抗體。
顯色底物（TMB）：辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化底物。
終止液：酸性溶液，終止顯色反應(yīng)。
洗滌緩沖液：20×濃縮液，需稀釋后使用。
封板膜：用于溫育時(shí)密封微孔板。
檢測(cè)原理
固相抗體結(jié)合：樣本中的CDHE與預(yù)包被在微孔板上的抗體結(jié)合。
酶標(biāo)抗體反應(yīng)：加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。
顯色反應(yīng)：加入TMB底物后，HRP催化顯色，顏色深淺與CDHE濃度成正比。
終止與檢測(cè)：加入終止液后，在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）。
操作步驟
試劑準(zhǔn)備：所有試劑平衡至室溫（20-25℃），洗滌緩沖液按比例稀釋。
加樣：
標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
樣本孔：加入待測(cè)樣本50μL（建議復(fù)孔檢測(cè)）。
空白孔：僅加洗滌液。
孵育：37℃溫育60分鐘，洗滌5次。
加酶標(biāo)抗體：每孔加入HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育60分鐘，洗滌5次。
顯色：每孔加TMB底物90μL，避光反應(yīng)15-30分鐘（顯藍(lán)色）。
終止：加入終止液50μL，溶液變黃色。
檢測(cè)：15分鐘內(nèi)于450nm波長(zhǎng)讀取OD值（建議使用雙波長(zhǎng)校正，參考630nm）。
注意事項(xiàng)
樣本處理：避免反復(fù)凍融；溶血、脂血或渾濁樣本需離心后取上清。
溫育控制：加樣時(shí)間不超過(guò)10分鐘，避免孔間預(yù)溫育時(shí)間差異。
洗滌：充分拍干液體，避免交叉污染。
儲(chǔ)存：未使用的板條密封保存于4℃，試劑按說(shuō)明書(shū)要求存放（部分需-20℃）。
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍：通常為0.156-10ng/mL（具體以標(biāo)準(zhǔn)曲線為準(zhǔn)）。
靈敏度：≤0.1ng/mL。
樣本體積：50-100μL。
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)約2.5小時(shí)（含孵育和顯色）。
運(yùn)輸與保存：2-8℃低溫運(yùn)輸，有效期6-12個(gè)月。
結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)四參數(shù)擬合方程計(jì)算樣本濃度。
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關(guān)鍵字： 人上皮性鈣黏附蛋白;ELISA試劑盒;
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