FITC-尿素酶/FITC-Urease/異硫氰酸熒光素-脲酶(Fluorescein Isothiocyanate-Urease)/FITC-Ure / Ure-FITC/綠色熒光標(biāo)記水解酶探針
組成單元:尿素酶作為活性核心,負(fù)責(zé)催化尿素水解;FITC 作為熒光標(biāo)記基團(tuán),提供可檢測的熒光信號(hào),二者通過尿素酶分子中的氨基(-NH?)與 FITC 的異硫氰酸酯基(-NCS)發(fā)生親核反應(yīng)實(shí)現(xiàn)連接;
物理狀態(tài):常規(guī)為淡黃色至黃色粉末或凍干品,易吸潮,科研級(jí)產(chǎn)品純度通?!?0%(以蛋白質(zhì)含量計(jì)),且需保證酶活性(通常≥5000 U/mg 蛋白);
分子量:因尿素酶來源不同存在差異(如刀豆來源尿素酶為同源六聚體,分子量約 480 kDa),標(biāo)記 FITC 后分子量會(huì)略有增加,具體取決于標(biāo)記率(通常每個(gè)酶分子可結(jié)合 5-20 個(gè) FITC 分子)。
酶活性保留:優(yōu)質(zhì)的 FITC - 尿素酶需保留尿素酶的核心催化活性,其催化反應(yīng)為:尿素 + H?O → 2NH? + CO?,反應(yīng)最適 pH 通常為 7.0-8.0(不同來源略有差異),最適溫度為 37-45℃,金屬離子(如 Ag?、Hg2?)會(huì)強(qiáng)烈抑制酶活性,而一些螯合劑(如 EDTA)對活性影響較??;
特異性:對尿素具有高度底物特異性,不催化其他酰胺類化合物水解,這一特性使其在尿素檢測相關(guān)應(yīng)用中具備高準(zhǔn)確性;
溶解性:易溶于水、生理鹽水及 pH 6.0-8.0 的緩沖液(如 PBS、Tris-HCl 緩沖液),不溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、丙酮),溶解后溶液澄清,無明顯沉淀。
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:凍干品在 - 20℃避光、密封條件下可穩(wěn)定保存 12-24 個(gè)月;溶解后需現(xiàn)配現(xiàn)用,若短期(1-2 天)使用,可在 4℃避光條件下保存,但酶活性會(huì)有輕微下降(通常下降≤10%),反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致酶活性顯著喪失(下降≥50%);
環(huán)境穩(wěn)定性:強(qiáng)光(尤其是紫外光)會(huì)導(dǎo)致 FITC 熒光淬滅,高溫(>50℃)、極端 pH(pH<4.0 或 pH>10.0)會(huì)使酶蛋白變性,進(jìn)而同時(shí)喪失熒光信號(hào)與酶活性,需嚴(yán)格控制使用與儲(chǔ)存環(huán)境。
相關(guān)產(chǎn)品:
FITC-琥珀酸,FITC-Succinicacid
FITC-尿素酶,FITC-Urease
FITC-鏈霉親和素,FITC-SA,FITC-Streptavidin
RB-DOX,羅丹明b-阿霉素
FITC-梔子苷,FITC-Geniposide
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