濾紙酶測定試劑盒/分光光度法/24樣
測定意義:
纖維素酶是由微生物產(chǎn)生的多組分的酶系,能水解纖維素 β-1,4 葡萄糖苷鍵生成葡萄糖,研究濾紙酶活力對纖維素酶的研究具有非常重要的意義。
測定原理:
濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與 3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在 540nm 處有最大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測定計算得濾紙酶的活力。
自備儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。試劑清單:
1、根據(jù)樣本數(shù)量取兩倍數(shù)量的濾紙條和 Ep 管,每支 Ep 管中放入一個卷狀濾紙條(注意要放入底部),作為底物。2、對照管:取 200μL 滅活的酶液,加入 500μL 試劑一,充分混勻,再加入放有濾紙條的 Ep 管中,標(biāo)注為對照管。3、測定管:取 200μL 酶液,加入 500μL 試劑一,充分混勻,再加入放有濾紙條的 Ep 管中,標(biāo)注為測定管。4、對照管和測定管同時置于 50℃水浴鍋中反應(yīng)30min。5、加入 800μL 試劑二,沸水浴 5min ,自來水冷卻后取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿中測定 540nm 處吸光值,分別記為 A 對照管和 A 測定管。
注 意:
正式測定前務(wù)必取 2 - 3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定;
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