人結(jié)腸癌細(xì)胞帶綠色熒光；HT-29/GFP (STR)
產(chǎn)品信息：
人結(jié)腸癌細(xì)胞帶綠色熒光（HT-29/GFP）是一種經(jīng)過(guò)基因改造的結(jié)腸癌細(xì)胞系，攜帶綠色熒光蛋白（GFP）基因，常用于腫瘤生物學(xué)、藥物篩選和熒光成像研究。以下是其詳細(xì)說(shuō)明、培養(yǎng)操作和特性：
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞帶綠色熒光；HT-29/GFP (STR) | 英文名稱 | HT-29/GFP：HT29GFP |
貨號(hào) | AXB10004 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞特性
來(lái)源：HT-29/GFP細(xì)胞系源自人結(jié)腸癌組織，是HT-29細(xì)胞系的GFP標(biāo)記版本。
形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)。
熒光特性：穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP），在藍(lán)光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，便于活細(xì)胞成像和追蹤。
生長(zhǎng)特性：生長(zhǎng)速度中等，倍增時(shí)間約為24-36小時(shí)，具有致瘤性，可在裸鼠中形成腫瘤。
STR鑒定：通過(guò)STR鑒定確認(rèn)細(xì)胞身份，避免交叉污染。
2. 培養(yǎng)操作
2.1. 培養(yǎng)基配置
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：通常使用McCO's 5A或DMEM高糖培養(yǎng)基。
補(bǔ)充成分：添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/鏈霉素混合液（雙抗）。
2.2. 培養(yǎng)條件
溫度與氣體環(huán)境：37℃，5% CO，飽和濕度。
換液頻率：每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基，或根據(jù)細(xì)胞密度和培養(yǎng)基顏色變化及時(shí)更換。
2.3. 細(xì)胞傳代
傳代比例：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)進(jìn)行傳代，推薦1:2至1:3的比例。
消化方法：使用0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA溶液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓并開(kāi)始脫落時(shí)，加入含血清培養(yǎng)基終止消化。
離心與重懸：將消化后的細(xì)胞懸液收集到離心管中，1000 rpm離心5分鐘，棄去上清液，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。
分瓶培養(yǎng)：將細(xì)胞懸液按適當(dāng)比例分配到新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量新鮮培養(yǎng)基，輕輕混勻后放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2.4. 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
凍存液配方：90%胎牛血清+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
凍存步驟：收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，計(jì)數(shù)后調(diào)整細(xì)胞密度至(1-5)×10^6個(gè)/mL，加入凍存液混勻，分裝至凍存管中，標(biāo)記好信息。將凍存管置于程序降溫盒中，先放-80℃冰箱過(guò)夜，然后轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。
復(fù)蘇步驟：從液氮罐中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。用75%酒精擦拭凍存管外壁后，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，1000 rpm離心5分鐘，棄去上清液，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，次日更換新鮮培養(yǎng)基。
3. 注意事項(xiàng)
無(wú)菌操作：整個(gè)操作過(guò)程需在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免細(xì)胞污染。
細(xì)胞狀態(tài)觀察：定期在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)狀態(tài)，記錄細(xì)胞密度和健康狀況，及時(shí)處理異常情況。
培養(yǎng)基選擇：確保使用新鮮配制的培養(yǎng)基，避免使用運(yùn)輸用的灌液培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞。
凍存與復(fù)蘇技巧：凍存時(shí)采用程序降溫法可提高細(xì)胞存活率；復(fù)蘇時(shí)快速解凍并立即加入培養(yǎng)基可減少細(xì)胞損傷。
細(xì)胞類型與特性：
原代細(xì)胞：直接從組織中分離的細(xì)胞，通常指第1-10代細(xì)胞，具有接近體內(nèi)狀態(tài)的特性。
細(xì)胞系：原代細(xì)胞首次傳代成功后形成的細(xì)胞群，可連續(xù)傳代。
細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，通常為第10-50代。
根據(jù)生長(zhǎng)方式分為：
貼壁細(xì)胞：需附著在培養(yǎng)瓶表面生長(zhǎng)，如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞：在培養(yǎng)基中自由懸浮生長(zhǎng)，如血液細(xì)胞。
半貼壁半懸浮細(xì)胞：兼具貼壁和懸浮生長(zhǎng)特性。
特殊細(xì)胞的生物特性舉例：
成纖維細(xì)胞：具豐富粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，能合成膠原纖維、彈性纖維及有機(jī)基質(zhì)；在外傷刺激下可恢復(fù)幼稚狀態(tài)，參與組織修復(fù)。
腫瘤細(xì)胞：具無(wú)限增殖、貼壁依賴或懸浮生長(zhǎng)、易轉(zhuǎn)化等特性，常用于藥物篩選與癌變機(jī)制研究。
神經(jīng)干細(xì)胞：具多向分化潛能（可分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞等），增殖能力強(qiáng)，在體外培養(yǎng)中可形成克隆球。
公司正在出售的產(chǎn)品：
OPCML 英文名稱： 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml | Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標(biāo)記CD205抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh EGR2 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh HER3/ErbB3 HER3受體抗體 規(guī)格 0.2ml |
ROCK2 英文名稱： Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 0.1ml | Anti-PRL 泌乳素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
DMAP1 英文名稱： DNA甲基轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml | AAA(Human anti-albumin antibody) ELISA Kit 人抗白蛋白抗體 |
SHC3 英文名稱： SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Fumarate hydratase/FH 富馬酸水合酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原 0.5mg | Phospho-NFKBIA (Tyr42) 英文名稱： 0酸化IKB α抗體 0.1ml |
2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血清白蛋白 1mg | NGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
ENPP6 英文名稱： 0酸酶/0酸二酯酶家族成員6抗體 0.2ml | Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標(biāo)記抗嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
C1q rat (ELISA Kit) 大鼠補(bǔ)體片斷C1qMulti-class antibodies規(guī)格： | 人結(jié)腸癌細(xì)胞帶綠色熒光；HT-29/GFP (STR)Cathepsin H 英文名稱： 組織蛋白酶H抗體 0.1ml |
Anti-FLG(filaggrin) 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-phospho-P53 (Ser6)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
注意事項(xiàng)與應(yīng)用：
無(wú)菌操作：必須嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，避免微生物污染和不同細(xì)胞間交叉污染。
營(yíng)養(yǎng)需求：需提供氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子等，動(dòng)物細(xì)胞還需血清。
抗生素使用：可添加雙抗或三抗預(yù)防污染，但長(zhǎng)期培養(yǎng)不建議持續(xù)使用，以防產(chǎn)生耐藥性。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)工具，可用于細(xì)胞生理代謝、藥物篩選、疫苗生產(chǎn)等研究。不同細(xì)胞系的具體培養(yǎng)條件需參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)經(jīng)驗(yàn)調(diào)整。
關(guān)鍵字： HT-29/GFP ;人結(jié)腸癌細(xì)胞帶綠色熒光;貼壁細(xì)胞;
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