人骨肉瘤細(xì)胞帶紅色熒光;143B/RFP (STR)
產(chǎn)品信息:

143B/RFP 是一種穩(wěn)定表達(dá)紅色熒光蛋白(RFP)的人骨肉瘤細(xì)胞系,源自原始 143B 細(xì)胞系(人骨肉瘤細(xì)胞),通過基因工程改造使其表達(dá)紅色熒光蛋白(如 tdTomato 或 mCherry 等),便于在顯微鏡下或活體成像中追蹤和觀察細(xì)胞行為12
以下是其詳細(xì)說明、培養(yǎng)操作和特性:
產(chǎn)品名稱 | 人骨肉瘤細(xì)胞帶紅色熒光;143B/RFP (STR) | 英文名稱 | B/RFP:BRFP |
貨號 | AXB10009 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞概述
來源:143B/RFP 細(xì)胞系來源于人骨肉瘤組織,屬于惡性腫瘤細(xì)胞系,常用于骨肉瘤的研究。
形態(tài):上皮細(xì)胞樣或成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長。
特性:該細(xì)胞系穩(wěn)定表達(dá)紅色熒光蛋白(RFP),便于在顯微鏡下或活體成像中追蹤和觀察細(xì)胞行為。
2. 培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:推薦使用 DMEM 培養(yǎng)基,添加 10%-20% 胎牛血清(FBS)和 1% 雙抗(青霉素和鏈霉素)。
培養(yǎng)環(huán)境:37°C,5% CO,濕度保持在 70%-80%。
傳代比例:通常采用 1:2 至 1:3 的比例進(jìn)行傳代,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90% 時進(jìn)行傳代。
3. 細(xì)胞操作
3.1. 復(fù)蘇
從液氮中取出凍存管,迅速放入 37°C 水浴中解凍。
將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有完全培養(yǎng)基的離心管中,離心后棄去上清液。
用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3.2. 傳代
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90% 時,棄去舊培養(yǎng)基,用 PBS 潤洗細(xì)胞。
加入胰蛋白酶消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓后,加入完全培養(yǎng)基終止消化。
離心后重懸細(xì)胞,按適當(dāng)比例分瓶培養(yǎng)。
3.3. 凍存
細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90% 時,用胰蛋白酶消化細(xì)胞。
離心后棄去上清液,用無血清凍存液(如 90% FBS + 10% DMSO)重懸細(xì)胞。
分裝至凍存管中,逐步降溫后放入液氮中保存。
4. 細(xì)胞特性
生長特性:143B/RFP 細(xì)胞生長速度較快,貼壁生長,形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣或成纖維細(xì)胞樣。
熒光特性:穩(wěn)定表達(dá)紅色熒光蛋白(RFP),便于在顯微鏡下或活體成像中追蹤和觀察細(xì)胞行為。
應(yīng)用領(lǐng)域:廣泛應(yīng)用于骨肉瘤的研究,包括腫瘤發(fā)生機(jī)制、藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究以及潛在治療策略的開發(fā)。
基本操作步驟:

原代培養(yǎng):取材→分離→培養(yǎng),需保持材料新鮮及嚴(yán)格無菌2。
傳代培養(yǎng):貼壁細(xì)胞需胰酶消化,懸浮細(xì)胞可直接傳代,離心后重懸分瓶23。
凍存與復(fù)蘇:使用含10%DMSO的凍存液,程序降溫后液氮保存;復(fù)蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點:

基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇:分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基(如DMEM、RPMI 1640)和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設(shè)置:
溫度:多數(shù)人和哺乳動物細(xì)胞為36-37℃,昆蟲細(xì)胞為27℃。
pH值:多數(shù)哺乳動物細(xì)胞為7.4,昆蟲細(xì)胞為6.2。
CO?濃度:通常維持5-7% CO?,多數(shù)細(xì)胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓:控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ING4 英文名稱: ING4抗體 0.2ml | Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 人脂蛋脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格 0.5ml | Rhesus antibody Rh E-Selectin/CD62E E選擇素抗體 規(guī)格 0.1ml |
GPR85 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體 0.2ml | Anti-GRP75 G蛋白偶聯(lián)受體75抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
BDKRB2 英文名稱: 緩激肽B2受體抗體 0.2ml | AACT/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記胰糜蛋白酶 0.1ml |
phospho-RAC1(Ser71) 英文名稱: 0酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh LRRC4B/NGL3 神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體 規(guī)格 0.2ml |
Beta-CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 小鼠激素β | TMEFF2 英文名稱: 增生肉蛋白1抗體 0.1ml |
25(OH)D3/25 HVD3(Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3) ELISA Kit 小鼠25羥基維生素D3 | Anti-DRP3/FITC 熒光素標(biāo)記Dystrobrevin α蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
FAM62B 英文名稱: 延伸突觸蛋白2抗體 0.2ml | Anti-CDK2 周期素依賴性激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit 大鼠性因子裂解蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 人骨肉瘤細(xì)胞帶紅色熒光;143B/RFP (STR)phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 英文名稱: 0酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml |
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ??窠?jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg | Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
具體特點如下:

環(huán)境與營養(yǎng):需無菌環(huán)境、精確的溫度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),動物細(xì)胞常需血清,植物細(xì)胞需激素。
生長方式:貼壁細(xì)胞需表面附著,懸浮細(xì)胞自由漂浮,半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度:貼壁細(xì)胞需胰酶消化傳代,懸浮細(xì)胞直接分瓶;密度達(dá)80%-90%時需傳代,避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性:對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感,需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應(yīng)用與局限:便于活細(xì)胞觀察與實驗控制,但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異,長期傳代可能導(dǎo)致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關(guān)鍵字: 143B/RFP;人骨肉瘤細(xì)胞帶綠色熒光;貼壁細(xì)胞;
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