人肝癌細(xì)胞帶熒光素酶；HuH-7/LUC (STR)
產(chǎn)品信息：
HuH-7/LUC細(xì)胞是一種攜帶熒光素酶（Luciferase）基因的人肝癌細(xì)胞系，源自原始的HuH-7細(xì)胞系。
該細(xì)胞系通過穩(wěn)定整合熒光素酶基因，能夠在加入底物熒光素（Luciferin）后發(fā)出生物熒光，便于活體成像和實時監(jiān)測腫瘤生長或轉(zhuǎn)移。以下是其詳細(xì)說明、培養(yǎng)操作和特性：
產(chǎn)品名稱 | 人肝癌細(xì)胞帶熒光素酶；HuH-7/LUC (STR) | 英文名稱 | HuH-7/LUC：HuH7LUC |
貨號 | AXB10029 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞特性
來源：HuH-7/LUC細(xì)胞是從人肝癌組織中分離得到的HuH-7細(xì)胞系衍生而來，屬于肝細(xì)胞癌模型。
熒光素酶標(biāo)記：該細(xì)胞系穩(wěn)定表達(dá)了熒光素酶基因，可在加入熒光素底物后發(fā)出生物熒光，適用于活體成像和實時監(jiān)測腫瘤生長或轉(zhuǎn)移。
形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長。
應(yīng)用：廣泛用于肝癌研究，包括腫瘤生長機制、藥物篩選、治療反應(yīng)評估及轉(zhuǎn)移研究等。
2. 培養(yǎng)操作
2.1. 培養(yǎng)基
使用DMEM高糖培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素溶液（雙抗）。
2.2. 培養(yǎng)條件
溫度：37°C。
氣體環(huán)境：95%空氣 + 5% CO
濕度：飽和濕度。
2.3. 傳代步驟
觀察細(xì)胞密度：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到80%-90%時進(jìn)行傳代。
去除舊培養(yǎng)基：輕輕吸去培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基。
清洗細(xì)胞：用預(yù)熱的PBS輕輕清洗細(xì)胞一次。
消化細(xì)胞：加入適量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，置于37°C培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況。
終止消化：加入適量含血清的新培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞脫落并均勻懸浮。
分裝細(xì)胞：將細(xì)胞懸液按1:2至1:4的比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中，加入新鮮培養(yǎng)基。
繼續(xù)培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
2.4. 凍存與復(fù)蘇
凍存：使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的凍存液，將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中，按照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序逐步降溫后存放在液氮罐中。
復(fù)蘇：從液氮中取出凍存管，迅速放入37°C水浴中搖晃解凍，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心后棄去上清液，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種到培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
3. 注意事項
熒光素酶活性檢測：在進(jìn)行生物發(fā)光成像前，需向細(xì)胞或動物模型中加入熒光素底物，使用活體成像系統(tǒng)（IVIS）檢測發(fā)光信號。
細(xì)胞狀態(tài)監(jiān)控：定期觀察細(xì)胞形態(tài)和生長狀態(tài)，確保無污染，并根據(jù)實驗需求調(diào)整傳代比例和培養(yǎng)條件。
基本操作步驟：
原代培養(yǎng)：取材→分離→培養(yǎng)，需保持材料新鮮及嚴(yán)格無菌2。
傳代培養(yǎng)：貼壁細(xì)胞需胰酶消化，懸浮細(xì)胞可直接傳代，離心后重懸分瓶23。
凍存與復(fù)蘇：使用含10%DMSO的凍存液，程序降溫后液氮保存；復(fù)蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇：分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI 1640）和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設(shè)置：
溫度：多數(shù)人和哺乳動物細(xì)胞為36-37℃，昆蟲細(xì)胞為27℃。
pH值：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞為7.4，昆蟲細(xì)胞為6.2。
CO?濃度：通常維持5-7% CO?，多數(shù)細(xì)胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓：控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產(chǎn)品：
HBeAg(2E6) 英文名稱： 人e抗原單克隆(檢測)抗體 0.1ml | Anti-GPR109A/HM74A/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Anti-CK5+6 細(xì)胞角蛋白5+6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
phospho-KLF5(Ser275) 英文名稱： 0酸化KLF5抗體 0.1ml | Anti-ER-Alpha 雌激素受體α抗體(用于western blot)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Rhesus antibody Rh RNF14 環(huán)指蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml | ACA ELISA Kit 大鼠抗中性粒/中心體抗體 |
IBTK 英文名稱： Bruton酪酸激酶抑制劑蛋白抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型受體抗體 規(guī)格 0.2ml |
Beta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit 小鼠β酚 | NKB 英文名稱： 神經(jīng)激肽B抗體 0.2ml |
5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羥色胺 | Anti-ADAM-TS12/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MAGEC2 英文名稱： 相關(guān)抗原C2抗體 0.2ml | Anti-GPA33/FITC 熒光素標(biāo)記糖蛋白A33(跨膜)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | 人肝癌細(xì)胞帶熒光素酶；HuH-7/LUC (STR)HRP標(biāo)記沙丁胺醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.3 |
Anti-CDK6 周期素依賴性激酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-CD167a/DDR1/FITC 熒光素標(biāo)記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
具體特點如下：
環(huán)境與營養(yǎng)：需無菌環(huán)境、精確的溫度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），動物細(xì)胞常需血清，植物細(xì)胞需激素。
生長方式：貼壁細(xì)胞需表面附著，懸浮細(xì)胞自由漂浮，半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度：貼壁細(xì)胞需胰酶消化傳代，懸浮細(xì)胞直接分瓶；密度達(dá)80%-90%時需傳代，避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性：對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感，需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應(yīng)用與局限：便于活細(xì)胞觀察與實驗控制，但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異，長期傳代可能導(dǎo)致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關(guān)鍵字： HuH-7/LUC;人肝癌細(xì)胞帶熒光素酶;貼壁細(xì)胞;
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