人非小細胞肺癌細胞+RFP；A549+RFP
產(chǎn)品信息：
人非小細胞肺癌細胞A549+RFP是一種經(jīng)過基因改造的細胞系，源自人非小細胞肺癌細胞A549，通過轉(zhuǎn)染紅色熒光蛋白（RFP）基因，使其穩(wěn)定表達紅色熒光。這種細胞系在癌癥研究、藥物篩選和活體成像等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價值。以下是其詳細說明、培養(yǎng)操作和
產(chǎn)品名稱 | 人非小細胞肺癌細胞+RFP；A549+RFP | 英文名稱 | RFPA549+RFP：RFPA549RFP |
貨號 | AXB10157 | 生長特性 | 貼壁生長 |
特性：
特性/操作 詳細信息
細胞來源與特性 源自人非小細胞肺癌細胞A549，通過慢病毒轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達紅色熒光蛋白（RFP）。
細胞呈上皮細胞樣，多角形，貼壁生長。
培養(yǎng)基 Ham's F-12K培養(yǎng)基或DMEM培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（PS）。
培養(yǎng)條件 37℃、5% CO、飽和濕度。
傳代方法 細胞密度達80%-90%時進行傳代。
用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落即終止消化。
離心收集細胞，按1:2至1:4比例分瓶傳代。
凍存與復(fù)蘇 凍存液為90%FBS+10%DMSO，程序降溫后液氮保存。
復(fù)蘇時37℃水浴快速解凍，加入完全培養(yǎng)基稀釋DMSO，離心后重懸接種。
應(yīng)用領(lǐng)域 用于癌癥研究、藥物篩選、活體成像等。
A549+RFP細胞系因其穩(wěn)定的紅色熒光表達和良好的生長特性，成為研究非小細胞肺癌的重要工具。在培養(yǎng)過程中，需注意維持適宜的培養(yǎng)條件和操作規(guī)范，以確保細胞的正常生長和熒光表達。
基本操作步驟：
原代培養(yǎng)：取材→分離→培養(yǎng)，需保持材料新鮮及嚴格無菌2。
傳代培養(yǎng)：貼壁細胞需胰酶消化，懸浮細胞可直接傳代，離心后重懸分瓶23。
凍存與復(fù)蘇：使用含10%DMSO的凍存液，程序降溫后液氮保存；復(fù)蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇：分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI 1640）和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設(shè)置：
溫度：多數(shù)人和哺乳動物細胞為36-37℃，昆蟲細胞為27℃。
pH值：多數(shù)哺乳動物細胞為7.4，昆蟲細胞為6.2。
CO?濃度：通常維持5-7% CO?，多數(shù)細胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓：控制在260-320mOsm/kg為宜。
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具體特點如下：
環(huán)境與營養(yǎng)：需無菌環(huán)境、精確的溫度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），動物細胞常需血清，植物細胞需激素。
生長方式：貼壁細胞需表面附著，懸浮細胞自由漂浮，半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度：貼壁細胞需胰酶消化傳代，懸浮細胞直接分瓶；密度達80%-90%時需傳代，避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性：對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感，需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應(yīng)用與局限：便于活細胞觀察與實驗控制，但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異，長期傳代可能導致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關(guān)鍵字： RFPA549+RFP;人非小細胞肺癌細胞+RFP;貼壁細胞;
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