人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP；SW620+GFP
產(chǎn)品信息：
SW620+GFP細(xì)胞是一種人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系，通過基因工程手段轉(zhuǎn)入綠色熒光蛋白（GFP）基因，使其在表達(dá)GFP的情況下發(fā)出綠色熒光，便于在熒光顯微鏡下觀察和追蹤細(xì)胞行為。以下是關(guān)于SW620+GFP細(xì)胞的詳細(xì)說明、培養(yǎng)操作和特性：
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP；SW620+GFP | 英文名稱 | GFPSW620+GFP：GFPSW620GFP |
貨號 | AXB10186 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞特性
來源：SW620細(xì)胞最初從一位51歲男性患者的結(jié)直腸腺癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中分離得到，SW620+GFP則是通過轉(zhuǎn)染GFP基因獲得的標(biāo)記細(xì)胞系。
形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長。
生長特性：倍增時間約為20-26小時，在裸鼠中具有高度致瘤性。
熒光特性：穩(wěn)定表達(dá)GFP，可在熒光顯微鏡下實(shí)時觀察，但隨傳代次數(shù)增加，熒光強(qiáng)度可能減弱。
2. 培養(yǎng)操作
2.1. 培養(yǎng)基
推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（P/S）溶液。若無L-15培養(yǎng)箱，可使用DMEM培養(yǎng)基并通入5% CO。
2.2. 培養(yǎng)條件
溫度：37°C。
氣體環(huán)境：SW620+GFP細(xì)胞在L-15培養(yǎng)基中培養(yǎng)時不需要CO，若使用DMEM培養(yǎng)基則需5% CO環(huán)境。
濕度：飽和濕度。
2.3. 傳代步驟
觀察細(xì)胞密度：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時進(jìn)行傳代。
去除舊培養(yǎng)基：輕輕吸去培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基。
清洗細(xì)胞：用預(yù)熱的PBS輕輕清洗細(xì)胞1-2次。
消化細(xì)胞：加入適量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況。
終止消化：加入適量含血清的新培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞脫落并均勻懸浮。
分裝細(xì)胞：將細(xì)胞懸液按1:2至1:4的比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中，加入新鮮培養(yǎng)基。
繼續(xù)培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
2.4. 凍存與復(fù)蘇
凍存：使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的凍存液，將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中，按照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序逐步降溫后存放在液氮罐中。
復(fù)蘇：從液氮中取出凍存管，迅速放入37°C水浴中搖晃解凍，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心后棄去上清液，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種到培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
3. 注意事項(xiàng)
熒光篩選：若需維持GFP熒光強(qiáng)度，可加入嘌呤霉素進(jìn)行篩選（起始濃度1ug/ml，逐步增至5ug/ml）。
無菌操作：全程嚴(yán)格無菌操作，避免污染4
用途限制：該細(xì)胞系僅供科研使用，不得用于臨床或動物實(shí)驗(yàn)。
基本操作步驟：
原代培養(yǎng)：取材→分離→培養(yǎng)，需保持材料新鮮及嚴(yán)格無菌2。
傳代培養(yǎng)：貼壁細(xì)胞需胰酶消化，懸浮細(xì)胞可直接傳代，離心后重懸分瓶23。
凍存與復(fù)蘇：使用含10%DMSO的凍存液，程序降溫后液氮保存；復(fù)蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點(diǎn)：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇：分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI 1640）和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設(shè)置：
溫度：多數(shù)人和哺乳動物細(xì)胞為36-37℃，昆蟲細(xì)胞為27℃。
pH值：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞為7.4，昆蟲細(xì)胞為6.2。
CO?濃度：通常維持5-7% CO?，多數(shù)細(xì)胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓：控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Anti-Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化雌激素受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原 0.5mg |
Rhesus antibody Rh MYL9 肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格 0.1ml | 5-HT ELISA Kit 大鼠5羥色胺 |
DHEA-S7 ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮S7Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Anti-CDK6 周期素依賴性激酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC 熒光素標(biāo)記顆粒酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-CRP/FITC 熒光素標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh FAM59B FAM59B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh HBZ/Hemoglobin ζ 血紅蛋白ζ鏈抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HER2 receptor(NT) HER2受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Fas-L human 人凋亡相關(guān)因子配體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
SHC3 英文名稱： SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 0.2ml | anti-RV IgG(Human anti-rubella virus IgG antibody) ELISA Kit 人IgG抗體 |
Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP；SW620+GFPBMPs ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白 |
14-3-3 family protein 英文名稱： 蘋果14-3-3蛋白抗體(植物) 1ml | TM4SF3 英文名稱： 跨膜蛋白4超家族成員3抗體 0.2ml |
具體特點(diǎn)如下：
環(huán)境與營養(yǎng)：需無菌環(huán)境、精確的溫度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），動物細(xì)胞常需血清，植物細(xì)胞需激素。
生長方式：貼壁細(xì)胞需表面附著，懸浮細(xì)胞自由漂浮，半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度：貼壁細(xì)胞需胰酶消化傳代，懸浮細(xì)胞直接分瓶；密度達(dá)80%-90%時需傳代，避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性：對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感，需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應(yīng)用與局限：便于活細(xì)胞觀察與實(shí)驗(yàn)控制，但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異，長期傳代可能導(dǎo)致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關(guān)鍵字： SW620+GFP;人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP;貼壁細(xì)胞;
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