細(xì)胞色素b5含量測定試劑盒/微量法/96S
測定意義:
細(xì)胞色素 P450 酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。細(xì)胞色素 P450 和細(xì)胞色素b5 是 P450 酶系的兩個血紅素蛋白,其比值的變化與 P450 代謝活性密切相關(guān)。
測定原理:
氧化型細(xì)胞色素 b5 經(jīng)連二亞硫酸鈉還原后,在 424nm 處有最大吸收峰,通過測定 424nm 和 490nm 處吸光值的差異,即可計算出細(xì)胞色素 b5 的含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、普通離心機,超速離心機、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。細(xì)胞色素 b5 含量測定操作:1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min。
2. 工作液置于 25℃水浴中預(yù)熱 30 min。
3. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 10 μL 蒸餾水,200μL 工作液,室溫靜置 2 min ,424nm 和490nm 處吸光值,424nm 處吸光值記為 A 空白管 1 ,490nm 處吸光值記為 A 空白管 2 ?!鰽 空白管=A 空白管 1- A空白管 2
4. 測定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 10 μL 待測液,200μL 工作液,室溫靜置 2 min ,424nm 和490nm 處吸光值,424nm 處吸光值記為 A 測定管 1 ,490nm 處吸光值記為 A 測定管 2。
注 意:
正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
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