果膠酶測定試劑盒/微量法/48S
測定意義:
果膠酶(pectinase)是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。
測定原理:
果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與 DNS 試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在 540nm 有特征吸收峰,測定 540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
自備儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。測定操作表:
對照管
測定管
試劑二(μL)
120
50℃水浴溫育 5min
樣本(μL)
30
煮沸樣本(μL)
混勻,50℃水浴反應(yīng) 30min
試劑三(μL)
150
沸水浴 5min ,冰浴冷卻終止反應(yīng),8000g ,4℃ , 離心 10min ,蒸餾水調(diào)零,取上清于微量石英比色皿或 96 孔板測定 540nm 處吸光值 A,△A=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。
注 意:
1、試劑二若有沉淀析出,請置于 50℃加熱溶解。
2、測定之前請先做預(yù)實驗,如果吸光值較高或較低,請用提取液做適當(dāng)?shù)南♂尰蛘呒哟髽颖玖?,并在計算公式中乘以稀釋倍?shù)或者以實際加入的樣本體積參與計算。
3、煮沸樣本建議在沸水中煮沸 10 分鐘,以將酶徹底滅活。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
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