己糖激酶(hexokinase，HK)試劑盒說明書                                                  

                                           分光光度法 50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義：

HK（EC 2.7.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是葡萄糖分解過程中的第一個關鍵酶，催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。

測定原理：

HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理：

1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3、血清（漿）樣品：直接檢測。

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