LS180人結(jié)直腸癌細(xì)胞
英文名稱 | LS180:LS180 | 規(guī)格 | 1×106 |
貨號 | XG-X3411 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性:
LS 180是從患有Dukes型結(jié)腸腺癌的58歲女性高加索人結(jié)腸直腸腺癌的患者的結(jié)腸中分離的貼壁細(xì)胞系。LS174T (ECACC目錄號87060401)來自同一名患者。
1） 來源：人，女性，結(jié)腸癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5） 用途：僅供科研使用。
1. LS180細(xì)胞基礎(chǔ)特性
來源：源自50歲男性結(jié)直腸腺癌患者的原位腫瘤。
關(guān)鍵特征：
上皮細(xì)胞樣，貼壁生長，可形成腺樣結(jié)構(gòu)。
表達(dá)腸道特異性標(biāo)志物（如MUC2、CEA）。
對5-氟尿嘧啶（5-FU）等化療藥物敏感。
培養(yǎng)條件：
培養(yǎng)基：EMEM或DMEM + 10% FBS + 1% NEAA（非必需氨基酸）。
傳代比例：1:3至1:5（80%匯合時(shí)，胰酶消化2-3分鐘）。
凍存液：90% FBS + 10% DMSO。
2. 熒光素酶標(biāo)記（以慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例）
2.1 實(shí)驗(yàn)步驟
預(yù)實(shí)驗(yàn)：
測定LS180的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率（建議使用MOI=5-20，梯度測試）。
優(yōu)化Polybrene濃度（通常2-8 μg/mL）。
病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)：
細(xì)胞鋪板：感染前24小時(shí)接種5×10^4細(xì)胞/孔（6孔板）。
加入慢病毒（含F(xiàn)Luc-PuroR基因）和Polybrene，孵育24小時(shí)后換液。
穩(wěn)定篩選：
轉(zhuǎn)導(dǎo)48小時(shí)后加入嘌呤霉素（1-3 μg/mL，劑量需預(yù)試），持續(xù)7-10天。
單克隆篩選：有限稀釋法獲得高表達(dá)克隆。
驗(yàn)證：
體外：檢測熒光素酶活性（D-熒光素底物，IVIS成像）。
體內(nèi)：皮下接種1×10^6 LS180-Luc細(xì)胞至裸鼠，監(jiān)測腫瘤發(fā)光信號。
注意事項(xiàng)：
污染防控：細(xì)菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴(yán)重時(shí)丟棄。
霉菌污染：顯微鏡下可見絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細(xì)胞立即丟棄。
支原體污染：無明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測，污染后可用支原體清除試劑處理。
操作規(guī)范：收到細(xì)胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。
未開封細(xì)胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請重發(fā)；客戶操作失誤導(dǎo)致問題不重發(fā)。
運(yùn)輸與保存：干冰運(yùn)輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃冰箱。
常溫運(yùn)輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。
公司出售的產(chǎn)品：
721型分光光度儀1毫升1厘米光徑塑料比色皿 | AF555標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3抗體 |
酵母DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 | 肌微管素相關(guān)蛋白6抗體 |
組織氧化型甘肽（GSSG）濃度熒光定量檢測試劑盒 | PE標(biāo)記人CD127 (IL7R)單克隆抗體 |
細(xì)胞CSF1R激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 糖基轉(zhuǎn)移酶28家族1抗體 |
腸出血性大腸埃希菌（Enterohaemorrhagic E. coli）鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 | EPB41L4A蛋白抗體 |
超強(qiáng)免疫化學(xué)封閉溶液 | 9號染色體開放閱讀框40抗體 |
BCL2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 | 慢性粒細(xì)胞白血病33抗體 |
血液維生素B1高效液相色譜法定量檢測試劑盒 | 蛋白酪氨酸磷酸酶PTPLB抗體 |
載玻片細(xì)胞NF KAPPA B P50蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 | 眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體 |
果菜谷比色法定量檢測試劑盒 | 利什曼原蟲表面蛋白酶(GP63)抗體 |
組蛋白H4-K8乙酰化檢測試劑盒 | X染色體開放閱讀框32抗體 |
細(xì)胞HSV（HERPES SIMPLX）病毒定性檢測試劑盒 | 線粒體核糖體蛋白L21抗體 |
細(xì)胞MAPKAP KINASE3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | LS180人結(jié)直腸癌細(xì)胞G蛋白通路抑制物蛋白2抗體 |
細(xì)胞單胺氧化酶A型（MAO－A）活性比色法定量檢測試劑盒 | 溶質(zhì)載體家族25成員18抗體 |
BrdU標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒 | 肝素輔助因子II抗體 |
5 倍 MOPS分子生物級濃縮緩沖溶液 | 周期素D2抗體 |
關(guān)鍵字： LS180;人結(jié)直腸癌細(xì)胞;LS180:LS180;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。