Hs 611.T（人霍奇金淋巴瘤細胞）
| 一、細胞基本屬性 |
| 細胞名稱 | Hs 611.T（人霍奇金淋巴瘤細胞） |
| 細胞別稱 | Hs 611.T |
| 商品貨號 | YB-75968HC |
| 種屬來源 | 人 |
| 年齡性別 | - |
| 組織來源 | 淋巴結組織 |
| 生長特性 | 半貼半懸 |
| 細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
| 背景簡介 | - |
| 生物安全等級 | 1 |
| 細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
| 支原體檢測 | 無 |
| 培養(yǎng)基 | DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗1% |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
| 倍增時間 | ~24-30小時 |
二、細胞接收后的處理
1) 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 半貼細胞和貼壁不牢（懸?。┘毎篢25瓶置于室溫放置約1h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細胞生長80%-90%對細胞進行傳代，傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。
4) 備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
三、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含8mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
【該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：】
a) 收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。
b) 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入5-6ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
c) 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a) 收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b) 根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度1×10^6~1×10^7/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c) 將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
四、培養(yǎng)注意事項
1) 細胞出現(xiàn)問題，予以重發(fā)情況
a) 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
b) 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品3 天內(nèi)，給我們提出真實的實驗結果，核實后重發(fā)；
c) 常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后2 天后，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
d) 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后2天后或常溫發(fā)貨的細胞靜置2 小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
e) 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，和每天的細胞照片，核實后予重發(fā)；
f) 細胞收到當天以及第2,3 天請拍照，3 天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7 天內(nèi)出現(xiàn)問題需提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題的照片以及細胞相關操作的詳細步驟，并跟技術人員溝通的，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā)。
2) 細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況
a) 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)；
b) 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
c) 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
d) 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3 天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)；
e) 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)；
f) 收到細胞并發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于7 天的，不重發(fā)；
g) 視具體情況而定
五、注意事項
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。
3. 該細胞僅供科研使用！說明書僅供參考以實際到貨說明書為準！
關鍵字： Hs 611.T;人霍奇金淋巴瘤細胞;
上海鈺博生物科技有限公司是2012年5月由“海歸”組成的創(chuàng)業(yè)團隊與兩個專業(yè)投資機構發(fā)起成立的，以
開發(fā)生產(chǎn)科研試劑和特色檢驗產(chǎn)品為方向，經(jīng)過兩年多的努力，已經(jīng)建立了免疫學和分子生物學的五個技術平臺，開發(fā)了ELISA/ELISpot酶聯(lián)免疫試劑盒、重組蛋白、熒光標記抗體、四聚體(Tetramer)特異性T細胞檢測試劑盒、Aimplex流式高通量多因子檢測、microRNA表達譜分析和功能研究等系列產(chǎn)品和服務，與國內(nèi)外免疫學、干細胞、傳染病和腫瘤研究及臨床檢驗領域的科學家們建立了良好的合作關系，形成了一定的品牌影響力。鈺博生物另建有七大技術服務平臺（ELISA定制服務，免疫學檢測服務、分子生物學技術服務、蛋白表達與純化技術服務、抗體制備技術服務、細胞培養(yǎng)技術服務、整體實驗課題服務。用專業(yè)的知識、專業(yè)的設備、專業(yè)的態(tài)度為客戶提供一站式實驗技術服務！