亞硝酸還原酶(NiR)測定試劑盒/微量法/48S
測定意義:
硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為 NO 或 NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。
測定原理:
亞硝酸還原酶可將 NO2—還原為 NO ,使樣品中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的 NO2—減少,即 540nm處吸光值的變化可反映亞硝酸還原酶的活性。
需自備的儀器和用品:
天平、研缽、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、水浴鍋、低溫離心機。測定操作表:
空白管
對照管
測定管
樣本(μL)
20
蒸餾水(μL)
40
試劑一 (μL)
試劑二(μL)
混勻后,25℃反應 1h
試劑三(μL)
充分震蕩 30S
上清液(μL)
70
工作液(μL)
140
充分混勻,,靜置 3min 后測定各管 540nm 處吸光值,分別記為 A 空白管、A 對照管、A 測定管??瞻坠苤灰鲆还?,每個測定管需設(shè)一個對照管。
1. 配制好的工作液 3 天內(nèi)使用完。
2. 若吸光值超過 1.5,將上清液進行適當?shù)南♂尯笤偌尤牍ぷ饕猴@色,并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
3. 嚴格控制顯色時間,否則會對結(jié)果有影響。
4. 標準曲線線性范圍為 0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。
5. A 空白管-(A 測定管-A 對照管)線性范圍為 0.02-1.5。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
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