NADH-谷氨酸合成酶(NADH-GOGAT)測定試劑盒/分光光度法/48樣

測定意義：

GOGAT 分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成 GS/GOGAT 循環(huán)，參與氨同化的調(diào)控。

測定原理：

GOGAT 催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸，形成兩分子的谷氨酸；同時 NADH 氧化生成 NAD+， 340nm 吸光度的下降速率可以反映 GOGAT 活性大小。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

(1)工作液的配制：在試劑二中加入 25mL 試劑一充分溶解混勻，置于 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 5min；現(xiàn)配現(xiàn)用（配好后3h 內(nèi)用完）；

(2)取 0.1mL 樣本和0.9mL 工作液于 1mL 比色皿中，混勻，加工作液的同時開始計時，在 340 nm 波長下記錄 20 秒時的初始吸光度 A1 和 5 分 20 秒時的吸光度 A2 ，計算 Δ=A1-A2。

注 意：

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。