谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)測(cè)定試劑盒/比色法100管/48樣
測(cè)定意義：
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-PX）是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶。它特異的催化還原型谷胱甘肽（GSH）對(duì)過(guò)氧化氫的還原反應(yīng)，可以起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。GSH-PX 的活性中心是硒半胱氨酸，硒是 GSH-PX 的必需部分，每克分子酶含 4 克原子硒。測(cè)定 GSH-PX 的活力可以作為衡量機(jī)體硒水平的一項(xiàng)生化指標(biāo)。
測(cè)定原理：
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）可以促進(jìn)過(guò)氧化氫（H2O2）與還原型谷胱甘肽（GSH）反應(yīng)生成 H2O 及氧化型谷胱甘肽（GSSG），谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力可用其酶促反應(yīng)的速度來(lái)表示，測(cè)定此酶促反應(yīng)中還原型谷胱甘肽的消耗，則可求出酶的活力。。
測(cè)定步驟：
酶促反應(yīng)：(試劑一應(yīng)用液提前在 37oC 預(yù)溫)
| 非酶管 | 酶 管 |
1mmol/L GSH（ml） | 0.2 | 0.2 |
待測(cè)溶血液（ml） |
| 0.2 |
37oC 水浴預(yù)溫 5 分鐘 |
試劑一應(yīng)用液 | 0.1 | 0.1 |
37oC 水浴準(zhǔn)確反應(yīng) 5 分鐘 |
試劑二（ml） | 2 | 2 |
待測(cè)溶血液 （ml） | 0.2 |
|
混勻，3500～4000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清 1ml 作顯色反應(yīng)。 |
注 意：
1、溶血液在室溫下 1 小時(shí)內(nèi)活力不變，建議樣品稀釋后不超過(guò) 1 小時(shí)測(cè)試為宜。
2、血樣要新鮮，肝素抗凝后放冰箱 4～8℃存放不要超過(guò) 48 小時(shí)。
3、測(cè)溶血液中 GPX 含量要注意樣品測(cè)試前紅細(xì)胞一定要充分溶血。（以對(duì)光觀察透亮為標(biāo)準(zhǔn)，若不透亮可以凍溶一次，但有部分大鼠及豬的紅細(xì)胞是不可凍溶越凍越不破，最好先取 1～2 只樣本做預(yù)試）
4、試劑一存放瓶要徹底洗干凈，應(yīng)用液要現(xiàn)用現(xiàn)配。
5 、1mmol/L GSH 、0.1 mmol/L GSH 、20 μmol/L GSH 的標(biāo)準(zhǔn)品，現(xiàn)用現(xiàn)配。
6 、37℃水浴反應(yīng)時(shí)間 5 分鐘，記錄反應(yīng)時(shí)間要準(zhǔn)確。
7、測(cè)定上清液當(dāng)天提取，當(dāng)天測(cè)試。
8、組織蛋白質(zhì)的測(cè)定法有多種，可參考實(shí)驗(yàn)方法學(xué)部分，或購(gòu)買本研究所蛋白定量試劑盒。
關(guān)鍵字： 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)試劑盒; GSH-PX ELISA KIT ; GSH-PX ELISA試劑盒 ;
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