Streptavidin-CY5：熒光染料Cy5標(biāo)記鏈霉親和素
Streptavidin-CY5是將熒光染料Cy5與鏈霉親和素通過(guò)特定化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng)制備而成的生物共軛試劑，憑借鏈霉親和素與生物素之間*高的親和力（解離常數(shù)達(dá)10?1? M）及Cy5優(yōu)良的熒光性能，在生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)、分子生物學(xué)研究等領(lǐng)域具有不可替代的作用。鏈霉親和素源自鏈霉菌，是一種分子量約66 kDa的四聚體蛋白，每個(gè)亞基均可特異性結(jié)合一個(gè)生物素分子，這種四價(jià)結(jié)合特性使其能高效橋連生物素化的靶標(biāo)分子與Cy5熒光基團(tuán)，實(shí)現(xiàn)信號(hào)的放大與可視化。
Cy5作為一種近紅外熒光染料，*大激發(fā)波長(zhǎng)約649 nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)約670 nm，具有穿透性強(qiáng)、背景熒光低、光穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)，可有效減少生物樣本（如組織、細(xì)胞）自身熒光的干擾，提升檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確性。Streptavidin-CY5的制備需嚴(yán)格控制反應(yīng)條件，通常采用N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）活化Cy5的羧基，再與鏈霉親和素分子表面的氨基發(fā)生酰胺化反應(yīng)，反應(yīng)后通過(guò)凝膠過(guò)濾、離子交換等層析技術(shù)純化，確保產(chǎn)品的純度與標(biāo)記率。優(yōu)質(zhì)的Streptavidin-CY5標(biāo)記率通常在2-4個(gè)Cy5分子/鏈霉親和素四聚體，既保證熒光信號(hào)強(qiáng)度，又不影響鏈霉親和素與生物素的結(jié)合活性。
在應(yīng)用場(chǎng)景方面，Streptavidin-CY5廣泛用于免疫熒光檢測(cè)、熒光原位雜交（FISH）、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡（Western Blot）等實(shí)驗(yàn)。例如，在免疫熒光成像中，可先將生物素標(biāo)記的一抗與樣本中的靶蛋白結(jié)合，再加入Streptavidin-CY5作為二抗偶聯(lián)物，通過(guò)熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察靶蛋白的定位與表達(dá)水平；在FISH實(shí)驗(yàn)中，可用于標(biāo)記生物素化的探針，實(shí)現(xiàn)染色體或核酸片段的精準(zhǔn)定位與定量分析。此外，其近紅外熒光特性使其特別適用于活體成像研究，可穿透較厚的組織樣本，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物體內(nèi)的生理過(guò)程與病理變化。
使用Streptavidin-CY5時(shí)需注意以下事項(xiàng)：儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)置于-20℃避光環(huán)境，避免反復(fù)凍融，防止熒光基團(tuán)降解與蛋白變性；使用前需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行適當(dāng)稀釋，避免濃度過(guò)高導(dǎo)致非特異性結(jié)合；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格控制孵育時(shí)間與溫度，確保特異性結(jié)合的充分性；同時(shí)，應(yīng)避免與強(qiáng)氧化劑、還原劑接觸，以免破壞熒光基團(tuán)與蛋白的結(jié)構(gòu)。
用途：科研
包裝：瓶裝
產(chǎn)地：西安瑞禧生物科技有限公司
關(guān)于我們：
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