CY3-Avidin：菁染料CY3標(biāo)記親和素

CY3-Avidin是將菁染料CY3與親和素（Avidin）通過特異性化學(xué)偶聯(lián)制備而成的熒光共軛試劑，依托親和素-生物素系統(tǒng)的高特異性高親和結(jié)合特性與CY3染料的優(yōu)良熒光性能，在生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)、分子生物學(xué)研究等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。親和素作為核心結(jié)合單元，與鏈霉親和素功能類似，但來源與結(jié)構(gòu)存在差異，而CY3染料的明亮橙色熒光則為靶標(biāo)分子的可視化檢測(cè)提供了可靠的信號(hào)保障。

親和素是一種從蛋清中提取的糖蛋白，分子量約68 kDa，同樣為四聚體結(jié)構(gòu)，每個(gè)亞基可特異性結(jié)合一個(gè)生物素分子，結(jié)合常數(shù)高達(dá)101? M?1，與生物素的結(jié)合具有高度特異性與穩(wěn)定性。與鏈霉親和素相比，親和素分子表面含有較多的糖基化位點(diǎn)，等電點(diǎn)更高（pI約10.5），在某些實(shí)驗(yàn)條件下可能存在一定的非特異性結(jié)合，但憑借來源廣泛、成本較低的優(yōu)勢(shì)，仍被廣泛應(yīng)用。CY3是一種常用的菁類熒光染料，*大激發(fā)波長(zhǎng)約550 nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)約570 nm，發(fā)出明亮的橙色熒光，熒光量子產(chǎn)率高，光穩(wěn)定性好，易于觀察與檢測(cè)，且可與其他熒光染料（如FITC、Cy5）搭配使用，實(shí)現(xiàn)多色熒光成像。CY3-Avidin的制備采用N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）活化法：首先利用NHS活化CY3分子上的羧基，形成活性酯中間體；再將活化后的CY3與親和素在適宜的緩沖體系（如PBS，pH 7.2-7.4）中進(jìn)行孵育反應(yīng)，活性酯中間體與親和素分子表面的氨基發(fā)生酰胺化反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共軛鍵；反應(yīng)完成后，通過凝膠過濾層析去除未反應(yīng)的游離CY3染料和雜質(zhì)，確保產(chǎn)品的高純度與均一性。優(yōu)質(zhì)的CY3-Avidin標(biāo)記率通常為2-4個(gè)CY3分子/親和素四聚體，親和素生物素結(jié)合活性保持率不低于85%。

應(yīng)用場(chǎng)景方面，CY3-Avidin廣泛用于免疫熒光成像、流式細(xì)胞術(shù)分析、熒光原位雜交（FISH）、蛋白質(zhì)印跡（Western Blot）等實(shí)驗(yàn)。在免疫熒光成像中，可先將生物素標(biāo)記的一抗與樣本中的靶蛋白結(jié)合，再加入CY3-Avidin作為熒光二抗偶聯(lián)物，通過熒光顯微鏡觀察靶蛋白的定位與表達(dá)水平，其明亮的橙色熒光可有效區(qū)分于其他熒光信號(hào)，適用于多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)；在流式細(xì)胞術(shù)分析中，可與生物素化的細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體結(jié)合，對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行分類與定量分析，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、臨床診斷等領(lǐng)域；在FISH實(shí)驗(yàn)中，可用于標(biāo)記生物素化的核酸探針，實(shí)現(xiàn)染色體或基因片段的精準(zhǔn)定位，助力遺傳病診斷與基因表達(dá)調(diào)控研究；在Western Blot實(shí)驗(yàn)中，可作為信號(hào)檢測(cè)試劑，與生物素化的一抗或二抗結(jié)合，通過熒光成像系統(tǒng)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的條帶，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的定性與半定量分析。

使用CY3-Avidin時(shí)需注意以下事項(xiàng)：儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)置于-20℃避光密封保存，建議分裝儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致熒光基團(tuán)降解和蛋白變性；使用前需在冰上緩慢解凍，并用合適的緩沖液（如PBS，pH 7.2-7.4）進(jìn)行稀釋，稀釋過程中應(yīng)輕輕混勻，避免劇烈震蕩；實(shí)驗(yàn)過程中需嚴(yán)格避光操作，尤其是在孵育和成像階段，減少熒光淬滅；孵育溫度建議控制在室溫或37℃，孵育時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整為30-60分鐘，確保特異性結(jié)合充分；由于親和素存在一定的非特異性結(jié)合傾向，可在孵育液中加入適量的封閉劑（如BSA、脫脂奶粉），降低非特異性結(jié)合；同時(shí)，需避免使用含有強(qiáng)氧化劑、還原劑的緩沖體系，以免破壞染料結(jié)構(gòu)與偶聯(lián)鍵。

用途：科研

包裝：瓶裝

產(chǎn)地：西安瑞禧生物科技有限公司  

關(guān)于我們：

西安瑞禧生物科技有限公司是一家專注于新型功能材料與生物試劑研發(fā)、生產(chǎn)及銷售的科技型企業(yè)。公司產(chǎn)品涵蓋納米材料、熒光微球、高分子材料、功能性修飾載體以及相關(guān)定制化服務(wù)，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、體外診斷、藥物遞送、材料科學(xué)等領(lǐng)域。瑞禧生物依托技術(shù)團(tuán)隊(duì)和實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，能夠?yàn)榭蒲袡C(jī)構(gòu)與企業(yè)提供產(chǎn)品和個(gè)性化解決方案。公司始終堅(jiān)持“創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)，品質(zhì)為先”的理念，致力于推動(dòng)科研與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的融合發(fā)展，為客戶提供專業(yè)、穩(wěn)定和可靠的材料支持與技術(shù)服務(wù)。 

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