CY5.5-Lysozyme 花菁染料Cy5.5標記溶菌酶
CY5.5-Lysozyme是通過共價偶聯(lián)技術將花菁染料Cy5.5標記到溶菌酶分子上形成的熒光標記蛋白。其中,Cy5.5是一種性能優(yōu)良的近紅外花菁染料,激發(fā)波長約675 nm,發(fā)射波長約694 nm,相較于Cy5,其熒光波長更長,在生物組織中的穿透深度更深,且受生物體內(nèi)自發(fā)熒光的干擾更??;溶菌酶作為一種具有天然*菌活性的堿性蛋白,分子結構穩(wěn)定、生物相容性好,其活性中心可特異性識別并水解細菌細胞壁的肽聚糖,在天然免疫防御中具有重要作用。CY5.5-Lysozyme完美結合了Cy5.5的高效近紅外熒光示蹤能力與溶菌酶的生物活性和生物相容性,是開展深層組織成像、活體示蹤及*菌機制研究的理想工具。
該標記蛋白的制備需嚴格控制反應條件,以實現(xiàn)染料與溶菌酶的高效偶聯(lián),同時*大限度保留溶菌酶的生物活性。常用的制備方法為活性酯法,具體步驟如下:首先選取適宜的緩沖體系(如pH 8.0-8.5的Tris-HCl緩沖液)溶解溶菌酶,確保蛋白處于穩(wěn)定的天然構象;將Cy5.5-NHS酯(Cy5.5的活性酯衍生物)溶解于無水DMSO中,緩慢滴加到溶菌酶溶液中,控制Cy5.5-NHS酯與溶菌酶的摩爾比在3:1-15:1之間,摩爾比過高易導致蛋白表面過多氨基被修飾,破壞活性中心或引起蛋白聚合,摩爾比過低則標記率不足,影響熒光示蹤效果;在室溫、避光條件下攪拌反應1-3小時,期間維持反應體系的pH穩(wěn)定;反應完成后,采用凝膠過濾層析(如Sephadex G-25)或透析法純化產(chǎn)物,去除游離的Cy5.5染料和有機溶劑;純化后需對產(chǎn)物進行全面質(zhì)量檢測:通過SDS-PAGE電泳驗證蛋白純度,利用熒光分光光度計測定熒光強度、激發(fā)/發(fā)射波長及Cy5.5標記率,采用濁度法檢測溶菌酶對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等標準菌株的抑菌活性,確保標記后溶菌酶的活性保留率滿足實驗要求,同時熒光信號穩(wěn)定、可重復。
CY5.5-Lysozyme的核心優(yōu)勢在于其長波長近紅外熒光特性,使其在活體成像、深層組織研究及臨床前診斷相關研究中具有不可替代的應用價值。在活體生物醫(yī)學研究中,將CY5.5-Lysozyme注入實驗動物體內(nèi)后,可通過近紅外活體成像系統(tǒng)實時監(jiān)測其在體內(nèi)的分布、靶向富集情況及代謝清除速率,為溶菌酶類藥物的藥代動力學、藥效學研究提供直觀的影像學數(shù)據(jù),尤其適合研究溶菌酶在肝臟、脾臟等深層組織中的作用過程;在細菌感染機制研究中,可利用Cy5.5的近紅外熒光信號,追蹤溶菌酶在感染部位的聚集過程,觀察其與細菌的相互作用,深入探究溶菌酶在感染防御中的作用機制;在臨床前診斷研究中,可作為靶向探針用于細菌感染灶的定位成像,借助溶菌酶對細菌的特異性結合能力,實現(xiàn)感染部位的精準識別,為感染性疾病的早期診斷提供新方法;此外,還可用于細胞內(nèi)溶菌酶的轉(zhuǎn)運與定位研究、溶菌酶-受體相互作用分析等場景。相較于Cy5、FITC等短波長熒光標記的溶菌酶,CY5.5-Lysozyme的熒光穿透性更強、背景干擾更低,成像清晰度更高,尤其適合活體和深層組織樣品的研究,是溶菌酶相關基礎研究與臨床轉(zhuǎn)化研究的重要工具蛋白。
用途:科研
包裝:瓶裝
產(chǎn)地:西安瑞禧生物科技有限公司

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關鍵字: 花菁染料Cy5.5標記溶菌酶;Lysozyme-CY5.5;CY5.5-Lysozyme;
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