貓杯狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貓杯狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Feline Calicivirus (FCV) Dye-based qRT-PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3389 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量RT-PCR技術(shù)，專(zhuān)用于貓杯狀病毒（Feline Calicivirus, FCV）的快速、高靈敏度檢測(cè)。適用于科研實(shí)驗(yàn)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒RNA的定量分析，具有特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。
產(chǎn)品組成
主反應(yīng)混合液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl?、緩沖液、熒光染料等。
陽(yáng)性對(duì)照：用于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制。
陰性對(duì)照：確保檢測(cè)無(wú)污染。
說(shuō)明書(shū)：詳細(xì)操作流程及數(shù)據(jù)分析方法。
注：需用戶(hù)自備RNA模板、引物（若未預(yù)混）、RNase-free耗材及熒光定量PCR儀。
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)靶標(biāo)：貓杯狀病毒保守序列，特異性強(qiáng)，無(wú)交叉反應(yīng)。
靈敏度：可達(dá)數(shù)百拷貝/反應(yīng)。
反應(yīng)體系：20 μL/次，50次/盒。
產(chǎn)物長(zhǎng)度：根據(jù)引物設(shè)計(jì)，典型產(chǎn)物為560 bp（電泳驗(yàn)證）。
適用機(jī)型：兼容常見(jiàn)熒光定量PCR儀（需根據(jù)機(jī)型添加ROX校正染料）。
操作步驟
樣本處理：提取待測(cè)樣本RNA，確保無(wú)降解。
反應(yīng)配制：
取15 μL主反應(yīng)混合液，加入5 μL RNA模板及引物（若需單獨(dú)添加）。
PCR擴(kuò)增：
按儀器程序設(shè)置：逆轉(zhuǎn)錄（50℃ 15 min）、預(yù)變性（95℃ 2 min）、40循環(huán)擴(kuò)增（95℃ 15 s → 60℃ 30 s，熒光采集）。
數(shù)據(jù)分析：
以陽(yáng)性對(duì)照Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測(cè)樣本病毒載量。
質(zhì)量控制
陽(yáng)性對(duì)照：應(yīng)出現(xiàn)典型S型擴(kuò)增曲線，Ct值在預(yù)期范圍內(nèi)。
陰性對(duì)照：無(wú)擴(kuò)增信號(hào)（Ct值≥40或無(wú)信號(hào)）。
運(yùn)輸與保存
運(yùn)輸條件：低溫干冰或冰袋運(yùn)輸。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)需在無(wú)核酸污染環(huán)境下進(jìn)行，建議使用超凈工作臺(tái)。
試劑解凍后需徹底混勻，避免離心管壁殘留。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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