Bcl-2單克隆抗體

英文名稱:Bcl-2 Mouse mAb
中文名稱:Bcl-2單克隆抗體
英文別名:Apoptosis regulator Bcl 2; Apoptosis regulator Bcl2; AW986256; B cell CLL/lymphoma 2; B cell leukemia/lymphoma 2; B cell lymphoma 2; Bcl 2; Bcl-2; Bcl2; BCL2 protein; C430015F12Rik; D630044D05Rik; D830018M01Rik; Leukemia/lymphoma, B-cell, 2; Oncogene B-cell leukemia 2; BCL2_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human, Rat (predicted: Mouse, Rabbit, Pig, Sheep, Cow, Dog, GuineaPig, Horse)
抗體來源:Mouse
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bcl-2 : 51-150/239
亞型:IgG
性狀:Size : 50ul/100ul/200ul
Liquid
Size : 200ug (PBS only)
Lyophilized
Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.
產(chǎn)品名稱 | Bcl-2單克隆抗體 | 英文名稱 | Bcl-2 Mouse mAb |
抗體來源 | Mouse | 貨號 | AK17202 |
純化方法:affinity purified by Protein G
克隆類型:Monoclonal
克隆號8B5
理論分子量:26 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:
Size : 50ul/100ul/200ul
0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
Size : 200ug (PBS only)
0.01M PBS
研究領(lǐng)域:
Cancer > Cancer Metabolism > Cellular metabolic process
Cancer > Cancer Metabolism > Response to hypoxia
Cancer > Cell Death > Apoptosis > Apoptosis Markers > Bcl 2 family
Cancer > Cell Death > Apoptosis > Metabolism
亞基:
Forms homodimers, and heterodimers with BAX, BAD, BAK and Bcl-X(L). Heterodimerization with BAX requires intact BH1 and BH2 motifs,
亞細(xì)胞定位:
Mitochondrion outer membrane; Single-pass membrane protein. Nucleus membrane; Single-pass membrane protein. Endoplasmic reticulum membrane; Single-pass membrane protein.
組織特異性:
Expressed in a variety of tissues.

1. 靶標(biāo)蛋白(Bcl-2)概述

1.1 基因與蛋白結(jié)構(gòu)
基因名稱:BCL2(位于人18號染色體q21.33)
蛋白家族:Bcl-2家族(含BH1-BH4結(jié)構(gòu)域)
分子量:26 kDa(部分異構(gòu)體可能略有差異)
亞細(xì)胞定位:線粒體外膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核膜
功能:
抑制凋亡:通過阻止線粒體細(xì)胞色素C釋放,抑制Caspase激活。
調(diào)控自噬:與Beclin-1相互作用影響自噬體形成。
癌癥關(guān)聯(lián):在淋巴瘤(如濾泡性淋巴瘤)、乳腺癌等中高表達(dá),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活。
2. 抗體的應(yīng)用
2.1 適用實(shí)驗(yàn)
Western Blot(WB):檢測Bcl-2表達(dá)(26 kDa條帶),需注意樣本類型(如腫瘤vs正常組織)。
免疫組織化學(xué)(IHC):評估Bcl-2在腫瘤組織中的表達(dá)水平(臨床常用預(yù)后標(biāo)志物)。
免疫熒光(IF):觀察Bcl-2在線粒體的定位(需與Mitotracker共染色)。
流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry):分析凋亡過程中Bcl-2的表達(dá)變化。
免疫共沉淀(Co-IP):研究Bcl-2與Bax、Bak等凋亡相關(guān)蛋白的相互作用。
2.2 研究領(lǐng)域
腫瘤學(xué):Bcl-2過表達(dá)與化療耐藥性相關(guān),靶向藥物(如Venetoclax)已用于臨床。
神經(jīng)科學(xué):在阿爾茨海默病中,Bcl-2表達(dá)下調(diào)可能導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡。
免疫學(xué):調(diào)控T細(xì)胞存活,影響自身免疫疾病。
3. 抗體特性
3.1 抗體類型
宿主:小鼠單克隆(常見克隆號:100/D5、Bcl-2/100)或兔單克隆。
反應(yīng)性:人、小鼠、大鼠(部分抗體可能跨反應(yīng))。
免疫原:通常為全長Bcl-2蛋白或特定肽段(如C端氨基酸150-200)。
3.2 推薦實(shí)驗(yàn)條件
實(shí)驗(yàn)方法 稀釋比例 關(guān)鍵注意事項(xiàng)
WB 1:500-1:1000 使用Tris-Glycine凝膠,推薦5%脫脂牛奶封閉
IHC(石蠟切片) 1:50-1:200 需熱修復(fù)(pH 6.0檸檬酸緩沖液)
IF 1:100-1:200 4% PFA固定,0.1% Triton透化
Flow Cytometry 1:50-1:100 需破膜劑
. 注意事項(xiàng)

4.1 樣本處理
陽性對照:推薦使用過表達(dá)Bcl--7)或淋巴瘤組織。
陰性對照:Bcl-2敲除細(xì)胞或同型對照抗體。
WB優(yōu)化:可能出現(xiàn)非特異性條帶,建議使用還原劑(如β-巰基乙醇)。
4.2 常見問題
信號弱:延長一抗孵育時間(4°C過夜)或提高濃度。
背景高(IHC):優(yōu)化封閉條件(如5% BSA代替血清)。
多條帶:可能因蛋白降解或翻譯后修飾,建議新鮮制備樣本。
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