預期用途
用于定量測定大鼠組織勻漿、血清、血漿或其他相關生物液體中的胃蛋白酶(PP)含量(體外研究使用)。
產(chǎn)品名稱
大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒
英文名稱
RatPP elisa kit
分類
Rat/大鼠Elisa試劑盒
檢測范圍
0.75ng/mL-48ng/mL
靈敏度
0.375ng/mL
貨號
PR8067
實驗原理
采用雙抗體夾心法:
包被抗體:純化的抗PP抗體預包被于微孔板;
抗原結(jié)合:樣品/標準品中的PP與包被抗體結(jié)合;
標記抗體結(jié)合:加入生物素化抗PP抗體或HRP標記抗PP抗體,形成復合物;
顯色反應:添加底物TMB,在HRP催化下顯藍色→酸終止轉(zhuǎn)為黃色;
定量分析:顏色深度與PP濃度正相關,在450nm波長測OD值,通過標準曲線計算濃度。
試劑盒組成
酶標板:96孔預包被板;
標準品:凍干粉2瓶,使用前需用樣品稀釋液重建至100 ng/ml,再梯度稀釋為系列濃度(100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56 ng/ml,0 ng/ml為稀釋液空白);
生物素化抗體/HRP標記抗體;
洗滌緩沖液、顯色底物TMB、終止液;
樣品稀釋液、酶結(jié)合物。
標準品配制關鍵:
溶解時靜置10分鐘,充分混勻;
梯度稀釋需在EP管中進行,禁止板上直接稀釋;
臨用前15分鐘內(nèi)配制。
樣品要求
樣本類型:血清、血漿、組織勻漿液;
處理要求:避免反復凍融,澄清后分裝保存(-20℃或-80℃)。
1.56 ng/ml – 100 ng/ml(通過系列標準品梯度確定)。
質(zhì)量控制要求
標準曲線需包含≥5點濃度(含零點);
板內(nèi)孔間變異系數(shù)(CV)應<15%;
復孔測定取均值。
注意事項
所有試劑使用前需平衡至室溫(20-25℃);
TMB顯色時間需嚴格控制,避免過度反應;
不同批次試劑不可混用;
僅限科研用途,不可用于診斷或治療。
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