商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒 | 英文名稱(chēng) | RatCOMP elisa kit |
檢測(cè)范圍 | 0.125ng/mL-8ng/mL | 貨號(hào) | PR10031 |
預(yù)期用途
本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或其他生物液體中的軟骨寡聚基質(zhì)蛋白（COMP）含量，適用于體外研究。
實(shí)驗(yàn)原理
雙抗體夾心法：
微孔板預(yù)包被抗大鼠COMP抗體，形成固相載體。
加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品后，COMP與固相抗體結(jié)合，再依次加入生物素化抗COMP抗體、辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的親和素，形成抗體-抗原-酶標(biāo)復(fù)合物。
經(jīng)洗滌后，加入底物TMB顯色，在HRP催化下產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，酸性終止液使其轉(zhuǎn)為黃色。
450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），OD值與COMP濃度呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
檢測(cè)范圍：
典型檢測(cè)范圍為0.2–8 μg/L。
試劑盒組成
酶標(biāo)板：96孔（預(yù)包被抗體）。
標(biāo)準(zhǔn)品：凍干粉2瓶（80 ng/ml或1000 ng/瓶），需用配套稀釋液復(fù)溶后梯度稀釋?zhuān)ㄈ?0 ng/ml、10 ng/ml等）。
生物素化抗體工作液：12 ml。
HRP標(biāo)記親和素/酶標(biāo)抗體：12 ml。
TMB底物溶液：12 ml。
終止液（硫酸溶液）：12 ml。
濃縮洗滌液（20×）：50 ml，需按比例稀釋后使用。
樣本稀釋液：12 ml（用于標(biāo)準(zhǔn)品及樣本稀釋?zhuān)?/span>
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品制備：復(fù)溶后梯度稀釋至所需濃度（如20–0.312 ng/ml），避免在酶標(biāo)板中直接稀釋。
加樣與孵育：
每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品100 μl，37℃孵育90分鐘。
洗滌后加入生物素化抗體，37℃孵育60分鐘。
顯色與終止：
加入TMB底物避光顯色15–30分鐘，終止后30分鐘內(nèi)測(cè)定OD值。
注意事項(xiàng)
試劑盒需2–8℃保存，復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品需15分鐘內(nèi)使用。
避免反復(fù)凍融樣本，高濃度樣本需用稀釋液預(yù)稀釋。
操作時(shí)需佩戴防護(hù)用具，終止液具腐蝕性。
結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)四參數(shù)擬合方程計(jì)算樣本濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白;COMP;ELISA試劑盒;
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