商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | human TNF-α elisa kit |
檢測(cè)范圍 | 1.25pg/mL-80pg/mL | 貨號(hào) | PH19985 |
產(chǎn)品用途
本試劑盒用于定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞上清液或組織勻漿等樣本中腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量，適用于科研用途。
實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：
包被抗體：微孔板預(yù)包被高純度人TNF-α捕獲抗體，形成固相抗體。
抗原結(jié)合：樣本中的TNF-α與固相抗體結(jié)合后，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。
顯色反應(yīng)：加入底物TMB（四甲基聯(lián)苯胺），在HRP催化下生成藍(lán)色產(chǎn)物，酸性終止液作用后轉(zhuǎn)為黃色。
定量分析：在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），OD值與TNF-α濃度呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
樣本類型
適用樣本：人血清、血漿（需抗凝處理）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等。
樣本處理：避免反復(fù)凍融，離心去除顆粒物，-20℃或-80℃保存。
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板
TNF-α標(biāo)準(zhǔn)品（梯度濃度）
HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體
TMB顯色液、終止液
洗滌緩沖液（濃縮液需稀釋）
封板膜、說(shuō)明書
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：按說(shuō)明書配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)品。
加樣孵育：依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本至微孔，37℃孵育。
洗滌：棄液后使用洗滌液清洗3-5次。
酶標(biāo)抗體孵育：加入HRP標(biāo)記抗體，37℃反應(yīng)。
顯色與終止：加入TMB避光顯色，終止后30分鐘內(nèi)檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
試劑盒需2-8℃保存，避免冷凍或強(qiáng)光照射。
不同批次試劑不可混用，標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)配現(xiàn)用。
操作時(shí)需佩戴防護(hù)用具，避免接觸終止液等腐蝕性液體。
結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)曲線方程計(jì)算樣本濃度。若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)范圍，需適當(dāng)稀釋后復(fù)測(cè)。
性能參數(shù)
靈敏度：通常≤1 pg/mL。
檢測(cè)范圍：15-1000 pg/mL。
特異性：與人TNF-β、IL-6等常見(jiàn)細(xì)胞因子無(wú)交叉反應(yīng)。
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關(guān)鍵字： 人腫瘤壞死因子α;TNF-α;ELISA試劑盒;
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