用途
本試劑盒用于定量檢測人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或其他生物液體樣本中巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）的濃度，適用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 | 人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | human MIF elisa kit |
分類 | Human/人Elisa試劑盒 | 檢測范圍 | 1.25ng/mL-80ng/mL |
靈敏度 | 0.625ng/mL | 貨號 | PH22904 |
實驗原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：
包被抗體：微孔板預(yù)包被高純度人MIF特異性抗體，形成固相抗體。
樣本孵育：加入待測樣本，樣本中的MIF與固相抗體結(jié)合。
酶標(biāo)抗體：加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。
顯色反應(yīng)：洗滌后加入底物TMB，在HRP催化下產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，終止液（酸性溶液）作用后轉(zhuǎn)為黃色。
定量分析：450 nm波長下測定吸光度（OD值），OD值與MIF濃度呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
試劑盒組成
（注：具體組分需以實際產(chǎn)品為準(zhǔn)，通常包含以下部分）
預(yù)包被微孔板
MIF標(biāo)準(zhǔn)品（梯度濃度）
HRP標(biāo)記檢測抗體
TMB顯色液
終止液
洗滌緩沖液（濃縮液）
樣本稀釋液
封板膜
樣本要求
血清/血漿：采集后離心去除顆粒物，-20℃保存避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞上清：離心去除沉淀，立即檢測或分裝凍存。
避免使用溶血、高脂或渾濁樣本。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：按說明書梯度稀釋。
加樣：每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育。
洗滌：去除未結(jié)合物質(zhì)。
加酶標(biāo)抗體：37℃孵育后洗滌。
顯色：加入TMB避光反應(yīng)，終止后30分鐘內(nèi)檢測。
結(jié)果計算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合回歸方程計算樣本濃度。
注意事項
試劑盒需2-8℃保存，復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品分裝凍存。
避免交叉污染，使用一次性吸頭。
顯色時間需嚴(yán)格控制，終止后顏色穩(wěn)定性有限。
性能參數(shù)
靈敏度：通常≤1.0 pg/mL。
檢測范圍：1.5-1000 pg/mL（線性范圍需驗證）。
特異性：與人MIF特異性結(jié)合，無交叉反應(yīng)。
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關(guān)鍵字： 人巨噬細(xì)胞移動抑制因子;MIF;ELISA試劑盒;
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