檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或其他生物體液中的IL-1水平。通過包被抗人IL-1單克隆抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-1，加入生物素化檢測(cè)抗體形成復(fù)合物，再結(jié)合辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素。經(jīng)底物TMB顯色后，在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），其與IL-1濃度呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
產(chǎn)品名稱 | 人白細(xì)胞介素1(IL-1)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | human IL-1 elisa kit |
分類 | Human/人Elisa試劑盒 | 檢測(cè)范圍 | 1.875pg/mL-120pg/mL |
靈敏度 | 0.9375pg/mL | 貨號(hào) | PH23801 |
試劑盒組成
96孔預(yù)包被酶標(biāo)板（2–8℃密封保存）
標(biāo)準(zhǔn)品（凍干粉，10 ng/瓶，復(fù)溶后濃度為10 ng/mL）
酶標(biāo)抗體工作液（HRP標(biāo)記，12 mL）
生物素化抗體工作液（12 mL）
10×標(biāo)本稀釋液（12 mL）
20×濃縮洗滌液（50 mL，使用前需稀釋）
TMB底物工作液（12 mL）
終止液（12 mL，酸性溶液）
封板膜、密封袋及說明書
樣本處理與保存
血清/血漿：采集后需離心（3000 rpm，10分鐘），避免溶血或反復(fù)凍融。短期保存于2–8℃（48小時(shí)內(nèi)），長(zhǎng)期需-20℃或-70℃凍存。
細(xì)胞上清液：離心去除顆粒物后分裝凍存。
組織勻漿：按比例加入生理鹽水勻漿，離心取上清。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品配制：用1 mL蒸餾水復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品，梯度稀釋至所需濃度。
加樣與孵育：每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育60分鐘，洗滌后加入生物素化抗體。
顯色與終止：加入TMB底物避光顯色15分鐘，終止后30分鐘內(nèi)測(cè)定OD值。
注意事項(xiàng)
試劑使用前需平衡至室溫，避免反復(fù)凍融。
洗滌需徹底，避免交叉污染。
不同批次試劑不可混用。
結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過四參數(shù)擬合方程計(jì)算樣本濃度。
性能參數(shù)
檢測(cè)范圍：通常為15.6–1000 pg/mL（具體以實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)曲線為準(zhǔn)）。
靈敏度：<5 pg/mL。
特異性：不與IL-1α/β亞型或其他細(xì)胞因子交叉反應(yīng)。
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