檢測原理
采用雙抗體夾心法。預包被抗人ICAM抗體捕獲樣本中的靶蛋白，加入HRP標記的檢測抗體后形成復合物，通過底物顯色反應測定450nm處吸光度（OD值），其強度與ICAM濃度呈正相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 人細胞間粘附分子(ICAM)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | human ICAM elisa kit |
分類 | Human/人Elisa試劑盒 | 檢測范圍 | 7.5ng/mL-480ng/mL |
靈敏度 | 3.75ng/mL | 貨號 | PH23954 |
規(guī)格：48T/96T
保存條件：2-8℃避光保存，有效期6個月
試劑盒組成
預包被微孔板（96孔）
ICAM標準品（6濃度梯度，凍干粉或液體）
樣本稀釋液（40×濃縮液）
HRP標記檢測抗體（100×濃縮）
洗滌緩沖液（20×濃縮）
底物A/B（TMB溶液）
終止液（2M硫酸）
封板膜
操作步驟
樣本準備
血清/血漿：3000rpm離心10分鐘，避免溶血。
細胞上清液：離心去除沉淀。
標準品與樣本加樣
標準品孔：加入50μL梯度標準品。
樣本孔：10μL樣本 + 40μL稀釋液（終稀釋倍數(shù)5×）。
空白孔：僅加稀釋液。
孵育與洗滌
37℃孵育60分鐘 → 棄液 → 每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復5次。
顯色與終止
每孔加底物A/B各50μL，避光反應15分鐘。
加終止液50μL，15分鐘內(nèi)測定OD450nm。
計算與分析
以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線。
樣本濃度通過曲線方程計算，最終濃度需乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項
樣本處理：避免反復凍融，2-8℃保存不超過48小時，長期保存需-20℃以下。
實驗條件：室溫平衡試劑30分鐘，嚴格控制孵育時間和溫度。
質(zhì)量控制：建議設(shè)置復孔，CV值應＜15%。
廢棄物處理：終止液含強酸，需按生化廢棄物規(guī)范處置。
性能參數(shù)
檢測范圍：0.1-50 ng/mL（具體以實際產(chǎn)品為準）
靈敏度：＜0.05 ng/mL
特異性：與人ICAM-1/ICAM-2無交叉反應
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關(guān)鍵字： 人細胞間粘附分子;ICAM;ELISA試劑盒;
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