商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Human VEGF165 ELISA Kit |
檢測(cè)范圍 | 62.5pg/mL-2000pg/mL | 貨號(hào) | PH32969 |
產(chǎn)品用途
本試劑盒用于定量檢測(cè)人血清、細(xì)胞上清液及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165（VEGF165）的濃度，適用于科研領(lǐng)域。
實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。微孔板預(yù)包被純化的人VEGF165抗體，形成固相抗體。樣本中的VEGF165與固相抗體結(jié)合后，再與辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合物，加入底物TMB顯色，在HRP催化下產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，酸化后轉(zhuǎn)為黃色。顏色深度與樣本中VEGF165濃度呈正相關(guān)，通過450 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度（OD值），依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。
主要組成
預(yù)包被微孔板
VEGF165標(biāo)準(zhǔn)品
HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體
TMB顯色液
終止液
洗滌緩沖液（濃縮）
樣本要求
類型：血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿等。
保存：2-8℃短期保存，長(zhǎng)期需分裝凍存于-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：按說明書梯度稀釋。
加樣：每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育。
洗滌：棄液體，洗滌緩沖液洗板5次。
加酶標(biāo)抗體：每孔加入HRP標(biāo)記抗體，37℃孵育。
顯色：加入TMB底物，避光反應(yīng)后終止。
檢測(cè)：酶標(biāo)儀450 nm讀取OD值。
注意事項(xiàng)
安全防護(hù)：避免直接接觸終止液及顯色底物，操作時(shí)穿戴防護(hù)用具。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境：避免強(qiáng)光照射，室溫波動(dòng)需控制在18-25℃。
試劑保存：未使用組分需按標(biāo)簽要求（2-8℃或-20℃）保存，避免反復(fù)凍融。
質(zhì)量控制：建議每批次實(shí)驗(yàn)設(shè)置復(fù)孔及質(zhì)控樣本。
局限性
僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165;VEGF165;ELISA試劑盒;
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