商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人腎腫瘤抗原(RAGE)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Human RAGE ELISA Kit |
檢測范圍 | 0.156ng/mL-10ng/mL | 貨號 | PH32978 |
檢測原理
采用雙抗體夾心法：
抗RAGE抗體預包被于酶標板，樣本/標準品中的RAGE與之結合。
加入生物素化檢測抗體，形成抗體-抗原-生物素化抗體復合物。
加入SA-BC（鏈霉親和素-生物素）復合物放大信號。
加入TMB顯色底物，藍色顯色后終止液變黃色。
在450nm波長下測OD值，RAGE濃度與OD值成正比（需繪制標準曲線計算濃度）。
樣本要求
適用樣本類型：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等。
樣本處理：
液體樣本（血清/血漿）：避免溶血或高血脂，4℃離心（3000rpm, 10min），分裝后-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
組織樣本：液氮速凍后勻漿，離心取上清分裝保存。
細胞培養(yǎng)上清：1500rpm離心10min后立即分裝凍存。
試劑盒組分（以96T為例）
| 名稱 | 規(guī)格（96T） |
| 預包被酶標板 | 8×12條 |
| 標準品 | 1支 |
| 標準品/樣品稀釋液 | 15ml |
| 生物素化檢測抗體（100×）| 120μl |
| SABC復合物 | 12ml |
| TMB顯色液（A/B） | 各6ml |
| 終止液 | 12ml |
| 20×濃縮洗滌液 | 60ml |
| 保存條件：4℃避光（生物素化抗體工作液需現(xiàn)用現(xiàn)配）。
關鍵參數(shù)
檢測范圍：0.156–10ng/mL
最低檢測限：0.066ng/mL
保質(zhì)期：12個月
操作流程
標準品稀釋：用稀釋液進行7梯度對倍稀釋（1/2至1/64），設置空白對照。
洗滌液配制：20×濃縮洗滌液按1:20蒸餾水稀釋（示例：1ml濃縮液+19ml水）。
加樣與孵育：
每孔加標準品/樣本100μl，37℃孵育90分鐘。
洗滌后加生物素化抗體（1×工作液），37℃孵育60分鐘。
加SA-BC復合物，37℃孵育30分鐘。
顯色與終止：
加TMB顯色液避光孵育15分鐘（藍色）。
加終止液（黃色），30分鐘內(nèi)測OD450值。
結果計算
以標準品濃度為橫坐標、OD450值為縱坐標繪制曲線，擬合方程計算樣本濃度。
公司出售的產(chǎn)品
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關鍵字： 人腎腫瘤抗原;RAGE;ELISA試劑盒;
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