檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測小鼠樣本中的白細胞介素17（IL-17）。將特異性抗小鼠IL-17抗體預(yù)包被于微孔板中，加入待測樣本或標(biāo)準(zhǔn)品后，IL-17與固相抗體結(jié)合。隨后加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，加入底物TMB顯色，在過氧化物酶催化下產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，酸化后轉(zhuǎn)為黃色。顏色的深淺與樣本中IL-17濃度呈正相關(guān)，通過450 nm波長測定吸光度（OD值），依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠白細胞介素17(IL-17)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Mouse IL-17 ELISA Kit |
分類 | Mouse/小鼠Elisa試劑盒 | 檢測范圍 |
|
靈敏度 |
| 貨號 | PM33080 |
樣本要求
血清：采集血液后靜置30分鐘，3000×g離心10分鐘，避免溶血或反復(fù)凍融。
血漿：建議使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝，3000×g離心30分鐘取上清。
細胞上清液：離心去除細胞碎片（3000×g，10分鐘）。
組織勻漿：按重量體積比（如1:9）加入生理鹽水勻漿，3000×g離心10分鐘取上清。
注意：樣本需分裝保存于-20℃或-80℃，避免反復(fù)凍融。
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板（48孔或96孔配置）
IL-17標(biāo)準(zhǔn)品（濃度梯度）
HRP標(biāo)記檢測抗體
洗滌緩沖液（20×濃縮液）
TMB顯色底物
終止液（酸性溶液）
說明書及標(biāo)準(zhǔn)曲線模板
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：按說明書梯度稀釋至工作濃度。
加樣：每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品100 μL，37℃孵育90分鐘。
洗滌：棄液后加入洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)5次。
加檢測抗體：每孔加入HRP標(biāo)記抗體100 μL，37℃孵育60分鐘。
顯色：洗滌后加入TMB底物100 μL，避光反應(yīng)15-30分鐘。
終止與檢測：加入終止液50 μL，15分鐘內(nèi)測定450 nm OD值。
注意事項
不同批次試劑不可混用。
避免底物接觸金屬或氧化劑。
若樣本濃度超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，需適當(dāng)稀釋后復(fù)測。
計算與結(jié)果
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，通過四參數(shù)擬合（或?qū)?shù)擬合）計算樣本濃度。
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