商品屬性

檢測原理

雙抗體夾心法 (Sandwich ELISA)

包被板：預(yù)包被抗兔OPG單克隆抗體于微孔板上。

加樣：加入待測樣本（血清/血漿/細(xì)胞上清）及系列標(biāo)準(zhǔn)品。

結(jié)合：樣本中OPG與包被抗體結(jié)合。

加入檢測抗體：加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體，形成“包被抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。

洗滌：移除未結(jié)合物。

顯色：加入底物TMB，HRP催化底物顯藍(lán)色。

終止：加入硫酸終止液，溶液變黃色。

讀數(shù)：在450nm波長讀取吸光度(OD值)。樣品中OPG濃度與OD值成正比。

試劑盒主要組分 (96T)

預(yù)包被微孔板: 12條×8孔，可拆卸

兔OPG標(biāo)準(zhǔn)品: 凍干品或高濃度原液 (典型濃度范圍：如10 - 1600 pg/mL，復(fù)溶后需系列稀釋)

酶標(biāo)結(jié)合物 (檢測抗體): HRP標(biāo)記抗兔OPG抗體濃縮液，需按說明書稀釋

樣本/標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20X 洗滌緩沖液: 使用前需用蒸餾水或去離子水1:20稀釋

底物溶液 (TMB)

終止液 (1M/2M H?SO?)

封板膜

說明書 (此為關(guān)鍵！)

關(guān)鍵性能參數(shù) (典型值，僅供參考)

檢測范圍: 通常為15.6 pg/mL - 1000 pg/mL 或 31.2 pg/mL - 2000 pg/mL (視具體廠家)

靈敏度 (最低檢測限 LoD): 通常 < 10 pg/mL

精密度:

批內(nèi)CV < 10%

批間CV < 15%

特異性: 可檢測天然和重組兔OPG。與兔體內(nèi)其他因子(如RANKL、其他TNF超家族成員)無明顯交叉反應(yīng)。

回收率: 通常在85% - 115%之間

所需設(shè)備 (用戶自備)

37°C 恒溫箱/培養(yǎng)箱

酶標(biāo)儀 (450nm主波長，建議620/630nm作為參比波長扣除背景)

微量移液器 (1-10μL, 20-200μL, 100-1000μL) 及吸頭

洗板機(jī) (或手動洗瓶、多通道移液器)

蒸餾水/去離子水

渦旋振蕩器

吸水紙

標(biāo)準(zhǔn)操作步驟

試劑準(zhǔn)備: 溶解標(biāo)準(zhǔn)品并按圖示梯度稀釋。按需稀釋酶標(biāo)結(jié)合物。稀釋20X洗液。

加樣: 每孔加入100μL稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本、陰/陽性對照（如有）。設(shè)置空白孔（僅加稀釋液）。輕叩混勻。

孵育: 37°C 孵育通常90分鐘。

洗滌: 手動/洗板機(jī)洗板4-6次，每次注滿洗滌液，拍干。

加酶標(biāo)結(jié)合物: 每孔加入稀釋好的酶標(biāo)抗體100μL?？瞻卓撞患印?/span>

孵育: 37°C 孵育通常30-60分鐘。

洗滌: 重復(fù)步驟4。

加底物: 每孔（包括空白孔）加入TMB底物100μL，避光。

顯色: 室溫(25°C)避光顯色15-25分鐘 (或達(dá)到預(yù)期顯色程度)。密切觀察！

終止: 每孔加入終止液50μL（或100μL，按說明），輕搖勻。

讀數(shù): 30分鐘內(nèi)于450nm讀OD值。

公司出售的產(chǎn)品