商品屬性

目的與適用范圍

本試劑盒用于定量測定兔血清、血漿及相關液體樣本中的轉化生長因子β2 (TGF-β2) 含量。適用于科研研究目的，不可用于臨床診斷或治療。

實驗原理

雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）：

固相包被：用純化的兔TGF-β2抗體包被微孔板表面，形成固相抗體。

樣本加入：樣本中的TGF-β2抗原依次加入微孔中，與固相抗體結合。

酶標抗體結合：加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的TGF-β2抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。

洗滌步驟：徹底洗滌未結合物質。

顯色反應：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺），在HRP催化下產(chǎn)生藍色，加酸終止后轉化為黃色。顏色的深淺與樣本中TGF-β2濃度呈正相關。

檢測：使用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度（OD值）。

試劑盒組成

標準組成 (基于參考內容合成一般性清單，實際組分可能因品牌而異)：

預包被微孔板（96孔）

TGF-β2標準品系列（濃度梯度：0、25、50、100、200、500 pg/mL）

HRP標記抗體工作液

TMB底物溶液

終止液（稀硫酸溶液）

洗滌緩沖液（濃縮，需稀釋使用）

封板膜

說明：具體組成可參考試劑盒實際包裝。摘要1提到試劑盒包含全部必要試劑，但未詳列；請操作前確認廠家提供的完整清單。

樣本采集與處理

樣本類型：新鮮兔血清或血漿。

采集要求：

采集后立即離心分離血清/血漿。

避免溶血和細菌污染（細菌可能產(chǎn)生假陽性）。

保存方法：

短期保存：置于2-8°C冰箱，最多24小時。

長期保存：如需多次檢測，樣本應分裝小體積，冷凍于-20°C以下。

關鍵提示：樣本解凍后需充分混勻（輕緩上下顛倒，避免強烈震蕩）。渾濁樣本須先離心或過濾澄清后檢測。

檢測步驟

操作流程（共需約3-4小時）：

準備工作：將試劑盒各組分恢復至室溫（約20-25°C），并按照說明書稀釋洗滌緩沖液。

加樣：

微孔中依次加入標準品、樣本和空白對照（各50 μL），均建議做雙份檢測以減少誤差。

覆蓋封板膜，37°C孵育30-60分鐘。

洗板：棄去孔內液體，用洗滌緩沖液洗板5次，每次靜置30秒后拍干。

加酶標抗體：每孔加入HRP標記抗體工作液50 μL，37°C孵育30分鐘。洗板同上。

顯色：每孔加入TMB底物溶液50 μL，37°C避光孵育15-20分鐘。若顯色過淺，可適當延長孵育時間。

終止反應：每孔加入終止液50 μL，終止后溶液由藍色轉為黃色。

讀數(shù)：30分鐘內用酶標儀測定450 nm波長下的OD值。

結果計算

以標準品OD值繪制標準曲線（濃度 vs. OD值），使用軟件（如Excel或專業(yè)ELISA分析工具）擬合回歸方程。

代入樣本OD值計算TGF-β2濃度：

公式示例：濃度 (pg/mL) = (樣本OD - 空白OD) / 斜率 × 截距。

注意：結果超出標準曲線范圍時，樣本需稀釋后重測。

關鍵注意事項

實驗操作：

嚴格按說明書步驟進行，結果以酶標儀讀數(shù)為準。

酶標板開封后未用完的孔應立即用密封袋加干燥劑保存。

所有檢測均做雙份（包括標準品、樣本和空白對照），取平均值以減小誤差。

樣本處理：

避免反復凍融樣本（否則蛋白效價可能降低）。

檢測新鮮樣本最佳；凍存樣本解凍后應充分混勻。

潛在干擾：

血細胞、纖維蛋白或細菌污染可能導致假陽性或本底加深。

安全規(guī)范：

終止液為酸溶液，操作時佩戴手套和護目鏡。

試劑含生物成分，禁止接觸皮膚或口服。

儲存與有效期

儲存條件：試劑盒置于2-8°C避光保存（避免凍結）；微孔板須放回干燥劑密封。

有效期：參考內容未提及具體時長；典型ELISA試劑盒有效期為6-12個月（保存不當可能導致活性降低）。

公司出售的產(chǎn)品