商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 兔L-Selectin/CD62Lelisa試劑盒 | 英文名稱 | Rabbit L-Selectin/CD62L ELISA Kit |
檢測范圍 | 15.625-1000pg/mL | 貨號 | PR33825 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒用于定量檢測兔血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的L-Selectin(CD62L)含量。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)，具有高靈敏度、高特異性和良好的重復(fù)性。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。將抗兔L-Selectin抗體預(yù)包被在微孔板上，加入標準品或樣品后，其中的L-Selectin會與固相抗體結(jié)合。洗板后加入生物素標記的抗兔L-Selectin檢測抗體，形成抗體-抗原-抗體復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素，最后加入TMB底物顯色。顏色的深淺與樣品中L-Selectin的濃度呈正相關(guān)。
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板: 96孔(8孔×12條)，可拆卸
標準品(凍干粉): 2支(1000pg/mL)，使用前用標準品稀釋液溶解
標準品稀釋液: 1瓶(10mL)
生物素標記抗體(100×): 1支(120μL)
抗體稀釋液: 1瓶(12mL)
HRP標記鏈霉親和素(100×): 1支(120μL)
鏈霉親和素稀釋液: 1瓶(12mL)
TMB底物溶液: 1瓶(10mL)
終止液(2M H?SO?): 1瓶(10mL)
洗滌液(20×): 1瓶(30mL)
封板膜: 4張
說明書: 1份
樣本要求
血清: 室溫血液自然凝固10-20分鐘，2000-3000rpm離心20分鐘取上清
血漿: EDTA或肝素抗凝，2000-3000rpm離心20分鐘取上清
細胞培養(yǎng)上清: 2000rpm離心20分鐘去除顆粒和聚合物
樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融，短期保存可置于2-8℃，長期保存應(yīng)分裝后-20℃保存
操作步驟
試劑準備:
將濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍
將生物素標記抗體和HRP標記鏈霉親和素分別用相應(yīng)稀釋液稀釋100倍
標準品稀釋:
用標準品稀釋液將標準品原液(1000pg/mL)按1:2倍比稀釋為500、250、125、62.5、31.25、15.625pg/mL
加樣:
分別設(shè)空白孔、標準孔和樣本孔
空白孔加標準品稀釋液100μL
標準孔加不同濃度標準品100μL
樣本孔加待測樣本100μL
37℃孵育90分鐘
洗板:
棄去液體，每孔加洗滌液350μL，靜置30秒后棄去，重復(fù)5次
加檢測抗體:
每孔加生物素標記抗體100μL
37℃孵育60分鐘
洗板5次
加酶結(jié)合物:
每孔加HRP標記鏈霉親和素100μL
37℃孵育30分鐘
洗板5次
顯色:
每孔加TMB底物90μL
37℃避光顯色15-30分鐘
終止反應(yīng):
每孔加終止液50μL
測定:
450nm波長讀取OD值(建議630nm作為參考波長)
性能參數(shù)
檢測范圍: 15.625-1000pg/mL
靈敏度: <5pg/mL
批內(nèi)變異系數(shù): <10%
批間變異系數(shù): <15%
回收率: 85-115%
特異性: 不與兔其他細胞因子發(fā)生交叉反應(yīng)
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關(guān)鍵字： 兔;L-Selectin/CD62L;ELISA試劑盒;
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