商品屬性:

| 產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因檢測試劑盒(熒光PCR法) | 分類
| 熒光PCR |
| 貨號 | XG-P653 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |

產(chǎn)品概述:

述本試劑盒基于實時熒光定量PCR技術(shù),專用于定性或定量檢測轉(zhuǎn)基因植物中PAT基因的存在及表達水平。PAT基因(膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因)是賦予植物草銨膦抗性的關(guān)鍵標(biāo)記基因,其檢測對轉(zhuǎn)基因作物監(jiān)管、食品安全及科研應(yīng)用具有重要意義。?
技術(shù)優(yōu)勢
?高靈敏度?:可檢測低至0.1%的轉(zhuǎn)基因成分?。
?特異性強?:針對PAT基因設(shè)計探針序列,避免非特異性擴增?。
?快速高效?:實時監(jiān)測擴增過程,2-3小時內(nèi)完成檢測?。
試劑盒組成:
?核心組分?:PAT基因PCR反應(yīng)液、內(nèi)參基因反應(yīng)液、Taq酶、UNG酶(防污染)及陽性/陰性對照品?。
?配套試劑?:核酸提取試劑(如CTAB法或商業(yè)提取盒)?。
應(yīng)用場景:
?轉(zhuǎn)基因作物監(jiān)管?:用于進出口檢驗、市場抽檢等?。
?科研領(lǐng)域?:轉(zhuǎn)基因植物研發(fā)中的基因表達分析?。
操作流程:
?樣本處理?:粉碎植物組織(粒徑≤0.5mm),提取DNA并純化?。
?PCR擴增?:設(shè)置50℃(UNG酶活化)→95℃(預(yù)變性)→循環(huán)擴增(95℃變性/60℃退火延伸)?。
?結(jié)果判定?:根據(jù)Ct值(PAT基因≤35為陽性,35-40需復(fù)測)?。
操作步驟:

一、樣本準(zhǔn)備
?樣本采集?:取植物組織(如葉片、種子),粒徑≤0.5mm?。
?DNA提取?:
采用CTAB法或商業(yè)提取試劑盒提取基因組DNA?
檢測DNA純度(OD260/280≈1.8)和濃度(建議50-100ng/μL)
二、試劑準(zhǔn)備
?1.反應(yīng)體系配制?(25μL/孔):
12.5μL PAT基因反應(yīng)液(含引物/探針)
8.5μL無核酸酶水
4μL模板DNA(陰性對照用無核酸酶水替代)
?2.對照設(shè)置?:
陽性對照(含PAT基因質(zhì)粒)
陰性對照(非轉(zhuǎn)基因植物DNA)
空白對照(無模板)
公司正在出售的產(chǎn)品:

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注意事項:
?
樣本處理與保存?
樣本需新鮮采集,避免老化或腐爛,建議使用幼嫩組織(如葉片、根尖)以提高DNA提取質(zhì)量?。
研磨時需在液氮中快速冷凍,防止DNA酶降解核酸?。
提取的DNA需通過紫外分光光度法檢測純度(OD260/OD280≈1.8)和濃度,避免雜質(zhì)干擾PCR反應(yīng)?。
?試劑與耗材選擇?
使用無DNA酶的離心管、槍頭及試劑,防止交叉污染?。
推薦白色PCR管以減少背景熒光干擾,提升檢測靈敏度?。
熒光定量PCR試劑需分裝保存,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致活性下降?。
?實驗操作規(guī)范?
嚴(yán)格分區(qū)操作:試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)需物理隔離,防止氣溶膠污染?。
每次實驗需設(shè)置陰性對照(無模板DNA)、陽性對照(已知PAT基因樣本)及空白對照(僅緩沖液)。
加樣時避免過量或不足,推薦低容量反應(yīng)管以提高熱傳導(dǎo)率?。
?污染防控?
定期監(jiān)測實驗室空氣、加樣槍及儀器表面污染,可通過擦拭采樣后擴增驗證?。
擴增產(chǎn)物需在專用區(qū)域處理,避免開蓋時形成氣溶膠污染?。
?結(jié)果判讀與驗證?
內(nèi)參基因(如玉米zein基因)需同步擴增,若未檢出則樣本無效?。
PAT基因陽性結(jié)果需通過熔解曲線分析或測序驗證特異性,排除假陽性?。
關(guān)鍵字: 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因;基因檢測試劑盒;熒光PCR法;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。