產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 | BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | 英文名稱 | BALB3T3cloneA31:BALB/3T3 clone A31 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | A01X1035 | 種屬 | 小鼠 |
種屬:小鼠
生長特性:貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
凍存條件:凍存液： 無血清非程序凍存液
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）:生長培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS +1% P/S
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例:1:2-1:3
推薦換液頻率:2-3次/周
參考資料(來源文獻)
背景描述:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年從裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細(xì)胞之一。BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對接觸抑制特別敏感，生長需高倍數(shù)稀釋，飽和濃度低。此外，BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對癌基因DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。
年齡（性別）:14-17FD;Sex unspecified
組織來源:胚胎；成纖維細(xì)胞
細(xì)胞類型:自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級:BSL-1
保藏機構(gòu):ATCC; CCL-163 ECACC; 86110401
培養(yǎng)操作要點
培養(yǎng)體系與條件：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基為DMEM（含高糖），添加10%胎牛血清（FBS）、1%雙抗（青鏈霉素），培養(yǎng)條件為37℃、5% CO?、95%空氣，濕度70%-80%。
注意：培養(yǎng)基pH敏感，建議使用含1.5 g/L碳酸氫鈉的DMEM，并避免頻繁換液（每2-3天換液一次）。
傳代操作：
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%時傳代，消化液為0.25%胰酶（可加0.53 mM EDTA），消化時間2-10分鐘（隨培養(yǎng)時間延長而增加），顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓、間隙增大時終止消化。
傳代比例1:2至1:4（初次建議1:2），離心收集細(xì)胞后重懸接種新瓶。
難消化時采用分次消化法：首次消化3-5分鐘后收集懸浮細(xì)胞，剩余貼壁細(xì)胞繼續(xù)消化至脫落。
形態(tài)與生長特性：
貼壁生長，形態(tài)多樣：低密度時呈不規(guī)則或梭形，高密度時（≥80%）呈規(guī)則纖維狀或“鵝卵石”樣單層排列。
增殖偏慢，倍增時間約26-30小時，培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)10%活漂浮細(xì)胞及碎片，屬正?，F(xiàn)象，建議保留漂浮細(xì)胞。
常見問題處理：
形態(tài)異常：多因密度過低，建議高密度傳代（鋪滿瓶底）3。
消化困難：嚴(yán)格控制消化時間，輕柔吹打，避免機械損傷；培養(yǎng)基顏色偏紫（堿性）時及時換液。
代次影響：細(xì)胞超過30代后，部分分子表達(dá)（如VCAM-1、MAdCAM-1）下降，建議使用低代次細(xì)胞（≤30代）。
應(yīng)用與注意事項
應(yīng)用方向：適用于血腦屏障模型構(gòu)建、神經(jīng)毒性研究、血管新生實驗（如Transwell遷移、管腔形成實驗）及藥物靶向遞送測試。
關(guān)鍵提醒：
細(xì)胞對溫度和pH敏感，培養(yǎng)基復(fù)溫4小時以上再使用。
收到細(xì)胞后需立即消毒、靜置，并檢查密度與貼壁情況，按需傳代或復(fù)蘇。
生物安全等級為BSL-1或2，僅限科研使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： BALB/3T3 clone A3;小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;貼壁細(xì)胞;
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