產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱(chēng) | bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 | 英文名稱(chēng) | bEnd3:bEnd.3 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | A01X1036 | 種屬 | 小鼠 |
種屬:小鼠
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
凍存條件:凍存液： 通用血清型程序凍存液
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）:生長(zhǎng)培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS +1% P/S
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例:1:2-1:4
推薦換液頻率:2-3次/周
注意事項(xiàng):
1.該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量少，鋪展面積大，高密度后形態(tài)會(huì)趨于一致，胞體密集。
2.細(xì)胞增殖偏慢，初次傳代建議1:2，細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過(guò)1:4。
3.注意觀察培養(yǎng)基顏色，顏色偏紫會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加。
4.消化時(shí)間會(huì)隨著細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間和細(xì)胞密度而有所不同，需要結(jié)合消化時(shí)細(xì)胞狀態(tài)來(lái)判斷，消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
背景描述:小鼠腦血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞bEnd.3 [BEND3]從內(nèi)皮瘤小鼠的腦組織中分離獲得，經(jīng)編碼多瘤病毒中間T抗原的逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)化而永生化。該細(xì)胞具有表達(dá)血管性血友病因子、可攝入低密度脂蛋白（LDL）等內(nèi)皮細(xì)胞特性。該細(xì)胞種持續(xù)表達(dá)細(xì)胞粘附分子1（ICAM-1），并在LPS、IL-1和TNF-a處理后升高。代數(shù)較早的bEnd.3細(xì)胞未受刺激時(shí)在表面表達(dá)MAdCAM-1，但30代后就不表達(dá)了。類(lèi)似地，30代前細(xì)胞持續(xù)表達(dá)血管細(xì)胞粘附分子1（VCAM-1），但30代后也不表達(dá)。腫瘤壞死因子（TNF alpha）可以誘導(dǎo)bEnd.3細(xì)胞表達(dá)P-選擇素的，且在30代后表達(dá)更強(qiáng)。bEnd.3可用于神經(jīng)科學(xué)研究。
年齡（性別）:6W;Sex unspecified
組織來(lái)源:大腦皮層
細(xì)胞類(lèi)型:轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí):BSL-1
抗原表達(dá)情況:ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +
基因表達(dá)情況:von Willebrand factor,ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +,The endothelial nature of these cells was confirmed by the observed expression of von Willebrand factor and uptake of fluorescently labeled low density lipoprotein (LDL). The expression of Peyer's Patch high endothelial receptor for lymphocytes, the mucosal vascular addressin (MAdCAM-1) and E-selectin can be induced on bEnd3.
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929
bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種來(lái)源于患有內(nèi)皮瘤的BALB/c小鼠腦組織的永生化細(xì)胞系，通過(guò)表達(dá)多瘤病毒中間T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體感染原代細(xì)胞實(shí)現(xiàn)永生化。
該細(xì)胞系具有典型的內(nèi)皮細(xì)胞特性，如表達(dá)血管性血友病因子（vWF）、攝取熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白（LDL），并可誘導(dǎo)表達(dá)細(xì)胞粘附分子（如ICAM-1、VCAM-1、P-selectin）等，
廣泛應(yīng)用于血腦屏障研究、神經(jīng)科學(xué)（如神經(jīng)元遷移、阿爾茲海默癥）、血管新生及炎癥反應(yīng)等領(lǐng)域。
培養(yǎng)操作要點(diǎn)
培養(yǎng)體系與條件：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基為DMEM（含高糖），添加10%胎牛血清（FBS）、1%雙抗（青鏈霉素），培養(yǎng)條件為37℃、5% CO?、95%空氣，濕度70%-80%。
注意：培養(yǎng)基pH敏感，建議使用含1.5 g/L碳酸氫鈉的DMEM，并避免頻繁換液（每2-3天換液一次）。
凍存與復(fù)蘇：
凍存液配方：90% FBS + 10% DMSO（或基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% DMSO+20% FBS），密度≥1×10?個(gè)/mL，程序降溫后液氮保存。
復(fù)蘇：37℃水浴快速解凍，離心去除凍存液，重懸于完全培養(yǎng)基后接種，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)后換液。
細(xì)胞特點(diǎn)與常見(jiàn)問(wèn)題
形態(tài)與生長(zhǎng)特性：
貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)多樣：低密度時(shí)呈不規(guī)則或梭形，高密度時(shí)（≥80%）呈規(guī)則纖維狀或“鵝卵石”樣單層排列。
增殖偏慢，倍增時(shí)間約26-30小時(shí)，培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)10%活漂浮細(xì)胞及碎片，屬正?，F(xiàn)象，建議保留漂浮細(xì)胞。
常見(jiàn)問(wèn)題處理：
形態(tài)異常：多因密度過(guò)低，建議高密度傳代（鋪滿瓶底）。
消化困難：嚴(yán)格控制消化時(shí)間，輕柔吹打，避免機(jī)械損傷；培養(yǎng)基顏色偏紫（堿性）時(shí)及時(shí)換液。
代次影響：細(xì)胞超過(guò)30代后，部分分子表達(dá)（如VCAM-1、MAdCAM-1）下降，建議使用低代次細(xì)胞（≤30代）。
應(yīng)用與注意事項(xiàng)
應(yīng)用方向：適用于血腦屏障模型構(gòu)建、神經(jīng)毒性研究、血管新生實(shí)驗(yàn)（如Transwell遷移、管腔形成實(shí)驗(yàn)）及藥物靶向遞送測(cè)試。
關(guān)鍵提醒：
細(xì)胞對(duì)溫度和pH敏感，培養(yǎng)基復(fù)溫4小時(shí)以上再使用。
收到細(xì)胞后需立即消毒、靜置，并檢查密度與貼壁情況，按需傳代或復(fù)蘇。
生物安全等級(jí)為BSL-1或2，僅限科研使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Rhesus antibody Rh RSPO1 分泌性蛋白R(shí)SPO1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-GRP75 G蛋白偶聯(lián)受體75抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
C3 ELISA Kit 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3 | Pepsinogen II 英文名稱(chēng)： 胃蛋白酶原C抗體 0.1ml |
phospho-ATG4A(Ser100) 英文名稱(chēng)： 0酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 0.1ml | Anti-SARS S-protein/FITC 熒光素標(biāo)記病毒表面蛋白S抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-ZNF474/ZFP106 鋅指蛋白474抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
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PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT 小鼠酸脫氫酶E1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Ezrin 英文名稱(chēng)： 埃茲蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Transglutaminase 2/TGase2 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-VIP receptor II/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/活性腸肽受體-II抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Nogo-A Ab(Human anti-Nogo-A antibody) ELISA Kit 人NOGO-A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | HSD3B7 英文名稱(chēng)： 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7抗體 0.2ml |
a-Glu(Mouse Alpha-Glucosidase) ELISA Kit 小鼠α葡萄糖苷酶 | bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株Rhesus antibody Rh MDH1 可溶性蘋(píng)果酸脫氫酶抗體 規(guī)格 0.1ml |
KLH 英文名稱(chēng)： 血藍(lán)蛋白抗體 0.1ml | CD82 Kit Human 人 CD82 / KAI-1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA |
關(guān)鍵字： bEnd.3;小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株;貼壁細(xì)胞;
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