MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 | MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 | 英文名稱 | MC3T3E1subclone14:MC3T3-E1subclone 14 |
貨號 | A01X1077 | 生長特性 | 貼壁生長 |
種屬:小鼠
生長特性:貼壁細胞
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
凍存條件:凍存液： 無血清非程序凍存液
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認）:生長培養(yǎng)基：MEMα+10% FBS +1% P/S
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例:1:3-1:6
推薦換液頻率:2-3次/周
參考資料(來源文獻)
背景描述:從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆，從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗壞血酸和3-4 mM無機磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(zhì)（ECM）。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化，不形成ECM，可以作為MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的陰性對照。礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA及唾液酸糖蛋白（BSP）、骨鈣素（OCN）和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白受體的mRNA。高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質(zhì)，表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨，低分化細胞只是產(chǎn)生纖維組織。這些細胞系是研究體外成骨細胞分化的好模型，尤其是ECM信號。它們和原代培養(yǎng)顱頂成骨細胞的行為類似。
年齡（性別）:<1D;Sex unspecified
組織來源:顱頂骨
細胞類型:自發(fā)永生化細胞
生物安全等級:BSL-1
基因表達情況:collagen
致瘤性:Yes, in immunodeficient mice (forms bone-like ossicles).
保藏機構(gòu):ATCC; CRL-2594
基本信息
細胞來源與特性：
來源于C57BL/6小鼠的顱頂骨
成纖維細胞樣形態(tài)，貼壁生長
自發(fā)永生化細胞系
保藏機構(gòu)：ATCC; CRL-25941
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基配置：
生長培養(yǎng)基：MEMα + 10% FBS + 1% P/S
培養(yǎng)條件：37℃，5% CO?，95%空氣
換液頻率：2-3次/周23
傳代操作：
傳代比例：1:3-1:4
消化時間：2-3分鐘
消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA
傳代步驟：PBS潤洗→加入胰酶消化→顯微鏡下觀察細胞變圓→加入含血清培養(yǎng)基終止消化→離心收集→重懸接種
凍存條件：
凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮保存
成骨誘導分化
誘導培養(yǎng)基配置：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：MEMα + 10% FBS + 1% P/S
添加成骨誘導添加劑（抗壞血酸和3-4mM無機磷酸鹽）
誘導步驟：
細胞融合度達到80-90%時進行誘導
加入預熱的成骨誘導分化完全培養(yǎng)基
每48-72小時更換新鮮誘導培養(yǎng)基
誘導培養(yǎng)2-4周
分化特點：
在含抗壞血酸和3-4mM無機磷酸鹽培養(yǎng)基中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化
10天后形成礦化良好的細胞外基質(zhì)（ECM）
礦化亞克隆表達成骨細胞標記的mRNA，包括唾液酸糖蛋白（BSP）、骨鈣素（OCN）等
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關(guān)鍵字： MC3T3-E;小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;貼壁細胞;
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