人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
產(chǎn)品信息
| 產(chǎn)品名稱 | 人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞 |
| 組織來源 | 子宮組織 |
| 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
| 細(xì)胞簡介 | 人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層，位于子宮腔面，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells, MSCs）來源于胚胎時期的中胚層組織，具有很強的自我復(fù)制和多向分化潛能，具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力，運用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 |
| 方法簡介 | 鈺博實驗室分離的人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。 |
| 質(zhì)量檢測 | 鈺博實驗室分離的人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 |
| 培養(yǎng)信息 | 自備試劑：0.25%胰蛋白酶 、PBS 、完全培養(yǎng)基：人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞完全培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)換液頻率：每2-3天換液一次生長特性：貼壁細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣傳代比例：1:2傳代特性：可傳3代左右消化液：0.25%胰蛋白酶人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用鈺博配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。 |
原代細(xì)胞傳代方法：
一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代
1、吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。
2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。
3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養(yǎng)液終止消化。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。
二、懸浮細(xì)胞的傳代
1、直接傳代
1）讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。
2）用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后，分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2、離心法傳代
1）將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，離心800-1000rpm，5分鐘。
2）去除上清，加新的培養(yǎng)液一離心管內(nèi)，用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液。
3）將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
原代細(xì)胞培養(yǎng)中的6個常見錯誤
錯誤＃1：一小管原代細(xì)胞在水浴中解凍一段時間
糾正＃1：原代細(xì)胞對解凍過程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴中，保持并輕輕旋轉(zhuǎn)直到內(nèi)容物剛剛解凍是很重要的。然后應(yīng)立即從水浴中取出小瓶，并轉(zhuǎn)移到無菌操作臺。確保您的培養(yǎng)瓶在解凍前已經(jīng)準(zhǔn)備就緒，以便可以立即用于接種細(xì)胞，并置于培養(yǎng)箱中。
錯誤＃2：解凍小瓶后直接離心原代細(xì)胞
糾正＃2：我們不建議在解凍后離心細(xì)胞，因為離心程序比少量的DMSO殘留更有害。記住，在恢復(fù)原代細(xì)胞后的第二天更換培養(yǎng)基以去除任何殘留的DMSO。
錯誤＃3：允許原代細(xì)胞變得過于融合
糾正＃3：當(dāng)生長至100％匯合時，原代細(xì)胞可以變得衰老。記住，原代細(xì)胞不是100％純，因此重要的是盡量減少污染細(xì)胞的生長。我們建議在細(xì)胞達到90-95％融合時，對原代細(xì)胞進行傳代培養(yǎng)。
錯誤＃4：傳代原代細(xì)胞時過度胰蛋白酶消化
糾正＃4：當(dāng)細(xì)胞傳代時，使用低濃度的胰蛋白酶并在顯微鏡下密切監(jiān)測細(xì)胞。此外，記得在胰蛋白酶消化后完全中和細(xì)胞中的胰酶，因為任何活性的胰蛋白酶都將損傷細(xì)胞。我們特別推薦專門為原代細(xì)胞配制的胰蛋白酶中和溶液，但也可以使用10％血清或大豆胰蛋白酶抑制劑。
錯誤＃5：原代細(xì)胞可以很容易地重新凍存
糾正＃5：通常我們不推薦重新凍存原代細(xì)胞，因為這可以促進細(xì)胞衰老和/或?qū)е鹿δ茏兓Ｔ?xì)胞非常敏感，重新凍結(jié)可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡或損傷。
錯誤6：原代細(xì)胞可以無限的增殖
糾正＃6：與細(xì)胞系不同，原代細(xì)胞具有有限的擴增能力。我們建議盡早使用原代細(xì)胞進行實驗以防止遺傳漂移。此外，如果你正在使用一個增值困難的細(xì)胞類型，你應(yīng)該密切監(jiān)測細(xì)胞形態(tài)，因為少量混雜的細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞）可能隨著時間的推移，大量生長從而成為主要細(xì)胞。
關(guān)鍵字： 人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞;人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞;
上海鈺博生物科技有限公司是2012年5月由“海歸”組成的創(chuàng)業(yè)團隊與兩個專業(yè)投資機構(gòu)發(fā)起成立的，以
開發(fā)生產(chǎn)科研試劑和特色檢驗產(chǎn)品為方向，經(jīng)過兩年多的努力，已經(jīng)建立了免疫學(xué)和分子生物學(xué)的五個技術(shù)平臺，開發(fā)了ELISA/ELISpot酶聯(lián)免疫試劑盒、重組蛋白、熒光標(biāo)記抗體、四聚體(Tetramer)特異性T細(xì)胞檢測試劑盒、Aimplex流式高通量多因子檢測、microRNA表達譜分析和功能研究等系列產(chǎn)品和服務(wù)，與國內(nèi)外免疫學(xué)、干細(xì)胞、傳染病和腫瘤研究及臨床檢驗領(lǐng)域的科學(xué)家們建立了良好的合作關(guān)系，形成了一定的品牌影響力。鈺博生物另建有七大技術(shù)服務(wù)平臺（ELISA定制服務(wù)，免疫學(xué)檢測服務(wù)、分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)、蛋白表達與純化技術(shù)服務(wù)、抗體制備技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、整體實驗課題服務(wù)。用專業(yè)的知識、專業(yè)的設(shè)備、專業(yè)的態(tài)度為客戶提供一站式實驗技術(shù)服務(wù)！