腺苷脫氨酶(ADA)活性測定試劑盒分光法/48樣
產(chǎn)品簡介：
腺苷脫氨酶（ADA ，EC 3.5.4.4）是一種琉基酶，是嘌呤核苷酸代謝的關(guān)鍵酶，與機(jī)體細(xì)胞的免疫活性有重要關(guān)系。腺苷脫氨酶（ADA）催化腺嘌呤核苷水解，產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨，利用氨在強(qiáng)堿的環(huán)境下與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液顏色穩(wěn)定。其在 630nm 處有特征吸收峰，通過檢測氨增加的速率，即可計算該酶活性大小。
試劑盒組成和配制：
試劑名稱 ( μ L） | 測定管 | 對照管 |
上清液(上步反應(yīng)) | 60 | 60 |
蒸餾水 | 180 | 180 |
試劑四 | 240 | 240 |
試劑五 | 120 | 120 |
試劑六 | 240 | 240 |
充分混勻，37℃放置20min后，全部液體轉(zhuǎn)移至1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中，于630nm處讀取吸光值A(chǔ)，ΔA=A測定管-A 對照管（每個樣本做一個自身對照）。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
腺苷脫氨酶( ADA )活性測定:
建議正式實驗前選取2個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費(fèi)!
樣本制備：
① 組織樣本：
稱取約 0.1g 組織（水分足的樣本可取 0.2-0.5g）， 加入1mL提取液；進(jìn)行冰浴勻漿。
12000rpm ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
[注]：也可以按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1 ：5~10 的比例提取。
② 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。
附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液（10μg/mL的氨（分子量是18）），把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2, 4, 6, 8, 10μg/mL。也可根據(jù)實際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
2. 按照顯色反應(yīng)階段的測定管加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字： ADA 試劑盒 ; ADA ELISA KIT ; ADA ELISA試劑盒 ;
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