GEC 豬原代胃粘膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 | GEC 豬原代胃粘膜上皮細(xì)胞 | 英文名稱 | GEC：GEC |
貨號 | AXB10509 | 生長特性 | 貼壁生長 |
用途 | 僅用于科研 實驗 | 種屬 | 豬 |
來源與鑒定
源自豬胃黏膜組織，通過膠原酶消化法分離獲得。
關(guān)鍵標(biāo)志物：
陽性表達(dá)：細(xì)胞角蛋白（Cytokeratin）、黏液素（Mucin）。
陰性表達(dá)：波形蛋白（Vimentin）。
應(yīng)用領(lǐng)域：豬流行性腹瀉病毒（PEDV）感染機(jī)制、胃黏膜屏障功能及營養(yǎng)吸收研究。
生長特性
形態(tài)：貼壁生長。
倍增時間：約48-72小時（37℃條件下）。
傳代限制：建議使用1-3代，避免老化。
二、培養(yǎng)操作流程
培養(yǎng)基與試劑
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM/F12（1:1）。
添加成分：
10%胎牛血清（FBS）
1%青霉素-鏈霉素（P/S）
特殊因子：
表皮生長因子（EGF，10 ng/mL）
胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒（ITS，5 μg/mL）。
消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA + 1 mg/mL膠原酶Ⅰ。
凍存液：90%完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO。
傳代培養(yǎng)（貼壁細(xì)胞）
消化監(jiān)控：
細(xì)胞達(dá)70%-80%匯合度時操作。
棄舊培養(yǎng)基，PBS洗滌1次，加入消化液（T25瓶1 mL），37℃消化5-8分鐘。
關(guān)鍵點(diǎn)：鏡下觀察細(xì)胞間隙變大、邊緣發(fā)亮即終止消化。
終止與離心：
加入2倍體積完全培養(yǎng)基終止消化，吹打均勻后1000 rpm離心5分鐘。
重懸與分瓶：
用1-2 mL完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2比例 分瓶。
補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至T25瓶6-8 mL，37℃、5% CO?培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
凍存與復(fù)蘇
凍存：
收集對數(shù)生長期細(xì)胞，密度調(diào)至1×10? cells/mL，程序性凍存（-80℃過夜→液氮）。
復(fù)蘇：
37℃水浴快速解凍，轉(zhuǎn)移至含5 mL預(yù)溫培養(yǎng)基的離心管。
1000 rpm離心5分鐘，重懸接種至T25瓶，次日換液。
三、關(guān)鍵注意事項
原代細(xì)胞特性
生長緩慢：需耐心等待，避免頻繁換液。
成纖維細(xì)胞污染：可通過差速貼壁法（15分鐘預(yù)貼壁）去除。
培養(yǎng)基優(yōu)化
血清選擇：推薦GIBCO南美胎牛血清。
抗生素：慶大霉素（50 μg/mL）可抑制胃黏膜共生菌。
污染防控
操作全程無菌，培養(yǎng)箱定期消毒。
收貨后48小時內(nèi)檢查支原體（PCR法檢測為陰性）。
科研應(yīng)用：
PEDV感染模型（如研究病毒受體APN表達(dá)）。
胃黏膜損傷修復(fù)（如幽門螺桿菌毒素作用）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) 0酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | C7orf64 英文名稱： 7號染色體開放閱讀框64抗體 0.2ml |
Anti-STAT3 /FITC 熒光素標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | sLR ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | RBM26 英文名稱： RNA結(jié)合蛋白26抗體 0.2ml |
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Anti-MUC5AC/Mucin 5AC 胃粘液素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | FLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原 0.5mg |
NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
COBLL1 英文名稱： Cordon bleu蛋白樣1抗體 0.2ml | GEC 豬原代胃粘膜上皮細(xì)胞OPCML 英文名稱： 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Brucella 布氏桿菌菌體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
關(guān)鍵字： GEC ;原代胃粘膜上皮細(xì)胞;貼壁細(xì)胞;
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