α-L阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)測(cè)定試劑盒/分光光度法/24樣
測(cè)定意義:
α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類,使細(xì)胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離,促進(jìn)果膠的增溶和降解。由于果實(shí)成熟過(guò)程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失,該酶活性在果實(shí)成熟軟化中的研究具有重大意義。
測(cè)定原理:
α-L-Af 分解對(duì)硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對(duì)-硝基苯酚,后者在 400nm 有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算 α-L-Af 活性。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。測(cè)定步驟:樣本測(cè)定(在 EP 管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μL)
測(cè)定管
對(duì)照管
試劑一
200
蒸餾水
試劑二
250
樣本
50
迅速混勻,放入 37℃準(zhǔn)確水浴30min
試劑三
1000
注 意:
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
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