還原糖含量測定試劑盒/微量法/48樣
測定意義:
還原糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄糖、果糖和麥芽糖等,是最常見的單糖和雙糖,其中葡萄糖和果糖不僅是呼吸作用的主要底物,也是進一步合成蔗糖、淀粉和纖維素的底物。
測定原理:
加熱促進堿性溶液中 3,5-二硝基水楊酸溶液與還原糖生成棕紅色氨基化合物,在 540nm 有特征吸收峰;在一定的濃度范圍內(nèi),還原糖含量與 540nm 吸光度成線性關系,根據(jù)標準曲線,即可求出樣品中還原糖的量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、蒸餾水。測定步驟:在 EP 管中加入下列試劑:
試劑(μL)
對照管
測定管
樣本
175
試劑二
125
蒸餾水
注 意:
1、如果 ΔA 大于 2,需要將樣本用試劑一稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)(若顯色后出現(xiàn)分層現(xiàn)象,可改用蒸餾水稀釋)。
2、正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
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