天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性測定試劑盒微板法/96樣

產(chǎn)品簡介：

天冬酰胺酶（ EC 3.5.1.1，ASNase）是一種酰胺水解酶，能夠?qū)? L-天冬酰胺脫去氨基生成L-天冬氨酸和氨。該酶具有抗腫瘤活性，在食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。

天冬酰胺酶（ASNase）催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨，利用氨在強(qiáng)堿的環(huán)境下與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液顏色穩(wěn)定。其在 630nm 處有特征吸收峰，通過檢測氨增加的速率，即可計算該酶活性大小。

試劑盒組成和配制：

所需的儀器和用品：
酶標(biāo)儀、96 孔板、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。

天冬酰胺酶（ASNase）活性測定:
樣本制備：
① 組織樣本：稱取約 0.1g 組織（水分足的樣本可取 0.2-0.5g），加入1mL提取液；進(jìn)行冰浴勻漿。12000rpm，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
 [注]：也可以按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例提取。

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

 [注]：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。
③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測