6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)/醛糖6-磷酸還原酶(A6PR)微板法/96樣
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH,EC 1.1.1.200)又稱醛糖 6-磷酸還原酶(Aldose-6-phos-phate reductase,A6PR),催化 D-山梨糖醇 6-磷酸和 D-葡萄糖 6-磷酸之間的相互轉(zhuǎn)化。研究發(fā)現(xiàn)該酶在蘋果葉片等薔薇科植物中廣泛分布,其在山梨醇合成中起著重要作用。6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)催化 D-葡萄糖 6-磷酸還原,并使還原型輔酶Ⅱ(NADPH)氧化。因此,通過檢測(cè) 340nm 下 NADPH 的下降速率,即可得出S6PDH的酶活性大小。
該酶催化的反應(yīng):D-sorbitol 6-phosphate+NADP+=D-glucose 6-phosphate+NADPH+H+試劑盒組成和配制:
試劑名稱
規(guī)格
保存要求
備注
提取液
液體100mL×1瓶
4℃保存
試劑一
粉劑 mg×2 支
用前甩幾下或離心使粉劑落入底部,每支分別加 0.6mL 蒸餾水溶解備用。用不完的試劑分裝后-20℃保存 ,禁止反復(fù)凍融 ,三天內(nèi)用完。
試劑二
液體 20mL×1 瓶
試劑三
粉劑 mg×1 支
臨用前甩幾下使粉劑落入底部,再加1.1mL 蒸餾水溶解備用。
所需的儀器和用品:酶標(biāo)儀、96 孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰。
6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)活性測(cè)定:建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
樣本制備:① 組織樣本:稱取約 0.1g 組織樣本,加入 1mL 提取液,冰浴勻漿, 12000rpm ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
[注]: 若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g): 提取液體積(mL) 為1:5~10的比例進(jìn)行提取。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
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