超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒(NBT法)/分光光度法/48樣

測定意義：

SOD（EC 1.15.1.1 ）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成 H2O2  和 O2。SOD  不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2  主要生成酶，在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。

測定原理：

通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.) ，O2-.可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜，后者在560nm  處有吸收；SOD  可清除 O2-. ，從而抑制了甲臜的形成；反應(yīng)液藍(lán)色越深，說明 SOD  活性愈低，反之活性越高。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL  玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

測定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min   以上，調(diào)節(jié)波長至 560nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將試劑二用蒸餾水稀釋兩倍，用多少配多少。（試劑二和蒸餾水 1 ：1  稀釋）。

3、將一瓶試劑四用 5mL  蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完），再用蒸餾水稀釋 4  倍，用多少配多少（試劑四和蒸餾水 1 ：3   稀釋）。

4、測定前將試劑一、三和四在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其他物種）水浴 5min   以上。

5、樣本測定（在 EP   管中依次加入下列試劑）：

注 意：

正式測定前務(wù)必取 2-3  個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。