產(chǎn)品信息：
來(lái)源與背景
源自一名59歲男性食管中段鱗狀細(xì)胞癌組織（侵襲深度不超過(guò)粘膜下層），由日本學(xué)者建立。
分子特征：攜帶p53突變及MYC癌基因擴(kuò)增，具備高度代表性。
產(chǎn)品名稱 | 人食管鱗癌細(xì)胞；KYSE-450 | 英文名稱 | KYSE-450：KYSE450 |
貨號(hào) | AXB10437 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
用途 | 僅用于科研 實(shí)驗(yàn) | 種屬 | 人 |
應(yīng)用領(lǐng)域：
食管癌發(fā)生機(jī)制（如癌基因突變、表觀遺傳調(diào)控）
藥物敏感性檢測(cè)（如化療/靶向藥物篩選）
信號(hào)通路研究（PI3K/AKT、MAPK、Notch通路）
形態(tài)與生長(zhǎng)
形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，呈不規(guī)則多邊形或長(zhǎng)梭形。
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)為主，部分懸浮細(xì)胞需離心收集。
倍增時(shí)間：約2-3天（37℃條件下）。
二、培養(yǎng)操作指南
培養(yǎng)體系與條件
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 高糖DMEM或MEM/F12
添加成分 10%胎牛血清（FBS）
培養(yǎng)環(huán)境 溫度：37℃ ；
氣相：空氣95% + CO? 5%
傳代比例 1:2至1:3（貼壁細(xì)胞需胰酶消化）
凍存條件 50%培養(yǎng)基 + 40% FBS + 10% DMSO，液氮儲(chǔ)存
操作步驟
復(fù)蘇
37℃水浴快速解凍，離心（1000 RPM，5分鐘）去除凍存液，重懸于預(yù)熱培養(yǎng)基，T25瓶培養(yǎng)過(guò)夜。
關(guān)鍵點(diǎn)：次日換液去除死細(xì)胞，連續(xù)觀察2-3天。
傳代
PBS清洗后，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分鐘（細(xì)胞變圓即終止），加完全培養(yǎng)基終止消化。
注意事項(xiàng)：
消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（過(guò)度消化損傷細(xì)胞）；
懸浮細(xì)胞可直接離心傳代（1000 RPM，5分鐘）。
凍存
匯合度80%時(shí)消化，離心后用凍存液重懸，程序降溫（-1℃/min）至-80℃后轉(zhuǎn)入液氮。
三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
污染防控
定期檢測(cè)支原體（推薦PCR法），避免交叉污染。
培養(yǎng)細(xì)節(jié)
貼壁問(wèn)題：若運(yùn)輸后細(xì)胞脫落，可離心收集（1000 RPM，5分鐘）后重新接種。
血清濃度：初始培養(yǎng)可提高至15% FBS促進(jìn)貼壁，穩(wěn)定后恢復(fù)10%。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
藥物敏感性檢測(cè)：推薦CCK-8或MTT法（接種密度5×103 cells/孔）。
基因編輯：CRISPR-Cas9轉(zhuǎn)染效率較高（建議使用脂質(zhì)體試劑）。
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案
問(wèn)題 原因 解決方案
細(xì)胞消化過(guò)度 胰酶作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 縮短至1分鐘內(nèi)，及時(shí)終止消化
生長(zhǎng)不均（島狀） 細(xì)胞團(tuán)塊未吹散 消化后輕柔吹打均勻
懸浮細(xì)胞增多 消化不足或貼壁能力下降 優(yōu)化胰酶濃度，離心收集懸浮細(xì)胞
公司正在出售的產(chǎn)品：
Anti-Nm23/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | ADCY9 英文名稱： 腺苷酸環(huán)化酶9抗體 0.2ml |
ETNK2 英文名稱： 乙激酶2抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格 0.3ml |
phospho-IKK beta(S474) 英文名稱： 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml | NAT8L 英文名稱： N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白抗體 0.2ml |
NOS ELISA Kit 大鼠合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Anti-Phospho-MK1/2 (Ser217/221) 0酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Anti-HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 熒光素標(biāo)記缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素結(jié)合蛋白 | 5HT5A receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體5A抗體 0.2ml |
單抗 單抗Multi-class antibodies規(guī)格： | Rhesus antibody Rh RAD21 核基質(zhì)蛋白21抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-VPS18 空泡分選蛋白18抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-Phospho-Btk(Tyr223) 0酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
phospho-MEK1 (Thr286) 英文名稱： 0酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml | 人食管鱗癌細(xì)胞；KYSE-450THAP2 英文名稱： THAP2蛋白抗體 0.1ml |
Anti-GLUT2/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
細(xì)胞類型與特性
原代細(xì)胞：直接從組織中分離的細(xì)胞，通常指第1-10代細(xì)胞，具有接近體內(nèi)狀態(tài)的特性。
細(xì)胞系：原代細(xì)胞首次傳代成功后形成的細(xì)胞群，可連續(xù)傳代。
細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，通常為第10-50代。
根據(jù)生長(zhǎng)方式分為：
貼壁細(xì)胞：需附著在培養(yǎng)瓶表面生長(zhǎng)，如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞：在培養(yǎng)基中自由懸浮生長(zhǎng)，如血液細(xì)胞。
半貼壁半懸浮細(xì)胞：兼具貼壁和懸浮生長(zhǎng)特性。
關(guān)鍵字： KYSE-450;人食管鱗癌細(xì)胞;貼壁細(xì)胞;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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